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Celdas H4
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroglioma
Sinónimos
H-4

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Celdas H4

Cell line · Número de producto 300184

Las células H4 son una línea celular de neuroglioma humano derivada del sistema nervioso central. Estas células se utilizan a menudo en la investigación neurológica, especialmente...

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01Información general

Descripción

Las células H4 son una línea celular de neuroglioma humano derivado del sistema nervioso central. Estas células se utilizan a menudo en la investigación neurológica, sobre todo en estudios centrados en la neurobiología y la neurofarmacología. Las células H4 constituyen un valioso modelo para comprender los mecanismos moleculares y celulares de los gliomas y ofrecen información sobre la biología tumoral, la respuesta a los agentes terapéuticos y la regulación de la expresión génica en el sistema nervioso.

La línea celular H4 es conocida por su sólida utilización en experimentos de neurotoxicidad y neuroprotección, sirviendo como herramienta para evaluar los efectos de diversas sustancias sobre las células neuronales. Los investigadores utilizan las células H4 para estudiar los procesos celulares implicados en la neurodegeneración y para cribar posibles compuestos neuroprotectores y neuroregenerativos. Sus características de crecimiento y mantenimiento constantes en condiciones de laboratorio las convierten en un recurso fiable para experimentos in vitro destinados a dilucidar funciones y trastornos neurológicos.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroglioma
Sinónimos
  • H-4

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tumorigénico
No
Cariotipo
Número modal = 75. Rango 45 = 80. Cromosoma Y presente

04Identificadores

Referencia
H4 (número de catálogo 300184 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1239

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
PGP9.5 positivo, NeuN positivo, NSE negativo
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
37 años
Origen étnico
Caucásico