Mine otse sisu juurde
H4 rakud
Kude
Aju
Haigus
Neuroglioom
Sünonüümid
H-4

Dokumendid

H4 rakud

Cell line · Toote number 300184

H4-rakud on kesknärvisüsteemist pärinev inimese neuroglioomi rakuliin. Neid rakke kasutatakse sageli neuroloogilistes uuringutes, eriti ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

H4 rakud on inimese neuroglioomi rakuliin, mis on saadud kesknärvisüsteemist. Neid rakke kasutatakse sageli neuroloogilistes uuringutes, eriti neurobioloogiale ja neurofarmakoloogiale keskenduvates uuringutes. H4 rakud on väärtuslik mudel glioomide molekulaar- ja rakumehhanismide mõistmiseks, andes ülevaate kasvaja bioloogiast, ravivastusest terapeutilistele ainetele ja geeniekspressiooni regulatsioonist närvisüsteemis.

H4 rakuliin on tuntud selle tugeva kasutamise poolest neurotoksilisuse ja neuroprotektsiooniga seotud katsetes, mis on vahendiks erinevate ainete mõju hindamisel neuronirakkudele. Teadlased kasutavad H4 rakke neurodegeneratsiooniga seotud rakuprotsesside uurimiseks ning potentsiaalsete neuroprotektiivsete ja neuroregeneratiivsete ühendite sõelumiseks. Nende järjekindlad kasvu- ja säilitamisomadused laboritingimustes teevad neist usaldusväärse ressursi in vitro katsete jaoks, mille eesmärk on selgitada neuroloogilisi funktsioone ja häireid.

Kude
Aju
Haigus
Neuroglioom
Sünonüümid
  • H-4

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Ei
Karyotüüp
Modaalarv = 75. vahemik 45 = 80. Y-kromosoomi olemasolu

04Tunnused

Viide
H4 (Cytioni katalooginumber 300184)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1239

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
PGP9.5 positiivne, NeuN positiivne, NSE negatiivne
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
37 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia