Pāriet uz saturu
H4 šūnas
Audums
Smadzenes
Slimība
Neiroglioma
Sinonīmi
H-4

Dokumenti

H4 šūnas

Cell line · Preces numurs 300184

H4 šūnas ir cilvēka neirogliomas šūnu līnija, kas iegūta no centrālās nervu sistēmas. Šīs šūnas bieži izmanto neiroloģiskajos pētījumos, jo īpaši ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

H4 šūnas ir cilvēka neirogliomas šūnu līnija, kas iegūta no centrālās nervu sistēmas. Šīs šūnas bieži izmanto neiroloģiskajos pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas vērsti uz neirobioloģiju un neirofarmakoloģiju. H4 šūnas ir vērtīgs modelis, lai izprastu gliomu molekulāros un šūnu mehānismus, sniedzot ieskatu audzēja bioloģijā, reakcijā uz terapeitiskiem līdzekļiem un gēnu ekspresijas regulācijā nervu sistēmā.

H4 šūnu līnija ir pazīstama ar to, ka to plaši izmanto eksperimentos, kas saistīti ar neirotoksicitāti un neiroprotekciju, kalpojot par līdzekli dažādu vielu ietekmes uz neironu šūnām novērtēšanai. Pētnieki izmanto H4 šūnas, lai pētītu neirodeģenerācijā iesaistītos šūnu procesus un pārbaudītu potenciālos neiroprotektīvos un neiroreģeneratīvos savienojumus. To nemainīgās augšanas un uzturēšanas īpašības laboratorijas apstākļos padara tās par uzticamu resursu in vitro eksperimentiem, kuru mērķis ir noskaidrot neiroloģiskās funkcijas un traucējumus.

Audums
Smadzenes
Slimība
Neiroglioma
Sinonīmi
  • H-4

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Nē
Kariotips
Modālais skaitlis = 75. diapazons 45 = 80. Y hromosomas klātbūtne

04Identifikatori

Atsauce
H4 (Cytion kataloga numurs 300184)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1239

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
PGP9.5 pozitīvs, NeuN pozitīvs, NSE negatīvs
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
37 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis