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HROC24 T1 M1
Tissu
Colon, établi à partir d'un PDx (xénogreffe dérivée d'un patient) de tissu primaire de CCR (Colon ascendens, UICC I, stade TNM T2N0M0R0L0V1 grading G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Maladie
Épithéliale
Site métastatique
Sans objet (stade I selon l'UICC ; classification TNM T2N0M0 ; absence de métastases régionales ou à distance)
Synonymes
HROC24x

Documents

HROC24 T1 M1

Cell line · Référence du produit 300813

This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.

€800.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description
Il s'agit de l'une des lignées de cellules tumorales établies par le Dr Michael Linnebacher à partir de PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) depuis 2006.
Tissu
Colon, établi à partir d'un PDx (xénogreffe dérivée d'un patient) de tissu primaire de CCR (Colon ascendens, UICC I, stade TNM T2N0M0R0L0V1 grading G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Maladie
Épithéliale
Site métastatique
Sans objet (stade I selon l'UICC ; classification TNM T2N0M0 ; absence de métastases régionales ou à distance)
Applications
Recherche sur le cancer colorectal ; modélisation du CCR de type MSI-H (instabilité des microsatellites) ; biologie du CCR induite par la mutation BRAF V600E ; biologie du CCR à un stade précoce ; prédiction de la réponse à l'immunothérapie ; recherche sur le CCR issue du PDx ; études sur des biobanques appariées à des patients HROC
Synonymes
  • HROC24x

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Petites cellules en colonies
Type de cellule
Cellules épithéliales
Tumorigène
Oui, sur des souris nude immunodéprimées
Statut de ploïdie
Euploïde
État du MSI
MSI-H
Temps de doublement
20 heures

04Identifiants

Référence
HROC24 T1 M1 (numéro de catalogue Cytion 300813)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U80

05Expression et sensibilité

Profil mutationnel
APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt, B-RAFV600E, PIK3CAwt
Virus
Exempt de virus pathogènes humains SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
Tous les 3 à 5 jours
Récupération après le dégel
Très rapide
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
98 ans
Origine ethnique
Caucasien