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- Tissu
- Colon, établi à partir d'un PDx (xénogreffe dérivée d'un patient) de tissu primaire de CCR (Colon ascendens, UICC I, stade TNM T2N0M0R0L0V1 grading G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
- Maladie
- Épithéliale
- Site métastatique
- Sans objet (stade I selon l'UICC ; classification TNM T2N0M0 ; absence de métastases régionales ou à distance)
- Synonymes
- HROC24x
Documents
HROC24 T1 M1
Cell line · Référence du produit 300813
This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.
Personnalisation / Recommandations
- HROC24 T1 M1Cell line€800.00
01Informations générales
- Description
- Il s'agit de l'une des lignées de cellules tumorales établies par le Dr Michael Linnebacher à partir de PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) depuis 2006.
- Tissu
- Colon, établi à partir d'un PDx (xénogreffe dérivée d'un patient) de tissu primaire de CCR (Colon ascendens, UICC I, stade TNM T2N0M0R0L0V1 grading G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
- Maladie
- Épithéliale
- Site métastatique
- Sans objet (stade I selon l'UICC ; classification TNM T2N0M0 ; absence de métastases régionales ou à distance)
- Applications
- Recherche sur le cancer colorectal ; modélisation du CCR de type MSI-H (instabilité des microsatellites) ; biologie du CCR induite par la mutation BRAF V600E ; biologie du CCR à un stade précoce ; prédiction de la réponse à l'immunothérapie ; recherche sur le CCR issue du PDx ; études sur des biobanques appariées à des patients HROC
- Synonymes
- HROC24x
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Homme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Statut OGM
- Sans OGM
- Informations détaillées sur le statut OGM
- No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- Petites cellules en colonies
- Type de cellule
- Cellules épithéliales
- Tumorigène
- Oui, sur des souris nude immunodéprimées
- Statut de ploïdie
- Euploïde
- État du MSI
- MSI-H
- Temps de doublement
- 20 heures
04Identifiants
- Référence
- HROC24 T1 M1 (numéro de catalogue Cytion 300813)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1U80
05Expression et sensibilité
- Profil mutationnel
- APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt, B-RAFV600E, PIK3CAwt
- Virus
- Exempt de virus pathogènes humains SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Rapport de fractionnement
- 1 à 3
- Densité de semis
- 2 x 104 cellules/cm2
- Renouvellement des fluides
- Tous les 3 à 5 jours
- Récupération après le dégel
- Très rapide
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- 98 ans
- Origine ethnique
- Caucasien
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Les accords conclus avec des tiers s'appliquent
- Oui