İçeriğe atla
HROC24 T1 M1
Doku
Kolon, Birincil CRC dokusunun PDx'inden (hasta kaynaklı ksenogreft) oluşturulmuştur (Kolon ascendens, UICC I, TNM evresi T2N0M0R0L0V1 derecelendirme G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Hastalık
Epitelyal
Metastaz yeri
Uygulanamaz (UICC evre I; TNM T2N0M0; bölgesel veya uzak metastaz yok)
Eş anlamlılar
HROC24x

HROC24 T1 M1

Cell line · Ürün numarası 300813

This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.

€800.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu, 2006 yılından bu yana PD Dr. Michael Linnebacher tarafından PDTx'ten (Hasta Türevli Tümör xenogreftleri) oluşturulan bir dizi tümör hücre dizisinden biridir.
Doku
Kolon, Birincil CRC dokusunun PDx'inden (hasta kaynaklı ksenogreft) oluşturulmuştur (Kolon ascendens, UICC I, TNM evresi T2N0M0R0L0V1 derecelendirme G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Hastalık
Epitelyal
Metastaz yeri
Uygulanamaz (UICC evre I; TNM T2N0M0; bölgesel veya uzak metastaz yok)
Uygulamalar
Kolorektal kanser araştırmaları; MSI-H (mikrosatellit instabilitesi) kolorektal kanser modellemesi; BRAF V600E mutasyonuna bağlı kolorektal kanser biyolojisi; erken evre kolorektal kanser biyolojisi; immünoterapiye yanıt tahmini; PDx temelli kolorektal kanser araştırmaları; HROC hasta eşleştirmeli biyobank çalışmaları
Eş anlamlılar
  • HROC24x

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Koloniler halinde küçük hücreler
Hücre türü
Epitel hücreleri
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış çıplak farelerde
Ploidi durumu
Euploid
MSI durumu
MSI-H
İki katına çıkma süresi
20 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROC24 T1 M1 (Cytion katalog numarası 300813)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1U80

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt , B-RAFV600E, PIK3CAwt
Virüsler
İnsan patojenik virüsleri SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV içermez.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
Çok hızlı
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
98 yıl
Etnik köken
Kafkas