Pereiti prie turinio
HROC24 T1 M1
Audinys
Gaubtinė žarna, sukurta iš PDx (iš paciento gauto ksenografinio transplantato) pirminio CRC audinio (Colon ascendens, UICC I, TNM stadija T2N0M0R0L0V1, klasifikacija G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Liga
Epitelis
Metastazių vieta
Netaikoma (UICC I stadija; TNM T2N0M0; nėra regioninių ar tolimų metastazių)
Sinonimai
HROC24x

Dokumentai

HROC24 T1 M1

Cell line · Prekės numeris 300813

This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Tai viena iš navikinių ląstelių linijų, kurias nuo 2006 m. sukūrė PD Dr. Michael Linnebacher iš PDTx (iš pacientų gautų navikų ksenograftų).
Audinys
Gaubtinė žarna, sukurta iš PDx (iš paciento gauto ksenografinio transplantato) pirminio CRC audinio (Colon ascendens, UICC I, TNM stadija T2N0M0R0L0V1, klasifikacija G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Liga
Epitelis
Metastazių vieta
Netaikoma (UICC I stadija; TNM T2N0M0; nėra regioninių ar tolimų metastazių)
Paraiškos
Kolorektalinio vėžio tyrimai; MSI-H (mikrosatelitų nestabilumo) kolorektalinio vėžio modeliavimas; BRAF V600E mutacijos nulemta kolorektalinio vėžio biologija; ankstyvųjų stadijų kolorektalinio vėžio biologija; imunoterapijos atsako prognozavimas; PDx pagrįsti kolorektalinio vėžio tyrimai; HROC tyrimai, atliekami naudojant pacientams pritaikytus biologinius bankus
Sinonimai
  • HROC24x

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Mažos ląstelės kolonijose
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Tumorogeninis
Taip, su imunosupresinėmis nuogomis pelėmis
Ploidijos būklė
Euploidinis
MSI būsena
MSI-H
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
20 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
HROC24 T1 M1 (Cytion katalogo numeris 300813)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1U80

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt , B-RAFV600E, PIK3CAwt
Virusai
Be žmogaus patogeninių virusų SV40, JC/BK, HBV, HCV, ŽIV.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-5 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Labai greitai
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
98 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių