Przejdź do treści
HROC24 T1 M1
Chusteczka
Okrężnica, utworzona z PDx (ksenograft pochodzący od pacjenta) pierwotnej tkanki CRC (Colon ascendens, UICC I, stadium TNM T2N0M0R0L0V1 w klasyfikacji G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Choroba
Nabłonek
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (stopień I według klasyfikacji UICC; TNM T2N0M0; brak przerzutów regionalnych ani odległych)
Synonimy
HROC24x

Dokumenty

HROC24 T1 M1

Cell line · Numer produktu 300813

This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis
Jest to jedna z serii linii komórek nowotworowych, które zostały stworzone przez PD Dr. Michaela Linnebachera z PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) od 2006 roku.
Chusteczka
Okrężnica, utworzona z PDx (ksenograft pochodzący od pacjenta) pierwotnej tkanki CRC (Colon ascendens, UICC I, stadium TNM T2N0M0R0L0V1 w klasyfikacji G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Choroba
Nabłonek
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (stopień I według klasyfikacji UICC; TNM T2N0M0; brak przerzutów regionalnych ani odległych)
Zastosowania
Badania nad rakiem jelita grubego; modelowanie raka jelita grubego typu MSI-H (z niestabilnością mikrosatelitarową); biologia raka jelita grubego związana z mutacją BRAF V600E; biologia raka jelita grubego we wczesnym stadium; prognozowanie odpowiedzi na immunoterapię; badania nad rakiem jelita grubego oparte na diagnostyce predykcyjnej (PDx); badania z wykorzystaniem biobanków dopasowanych do pacjentów z rakiem jelita grubego o wysokim stopniu złośliwości (HROC)
Synonimy
  • HROC24x

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Małe komórki w koloniach
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy nagich z obniżoną odpornością
Status ploidii
Euploid
Stan MSI
MSI-H
Czas podwojenia
20 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HROC24 T1 M1 (numer katalogowy Cytion 300813)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U80

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt, B-RAFV600E, PIK3CAwt
Wirusy
Wolny od ludzkich wirusów chorobotwórczych SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Bardzo szybko
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
98 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski