Премини към съдържанието
HROC24 T1 M1
Тъкан
Дебело черво, създадено от PDx (ксенографт, получен от пациент) на първична тъкан на CRC (Colon ascendens, UICC I, TNM стадий T2N0M0R0L0V1, степен G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Заболяване
Епителиален
Място на метастазите
Неприложимо (стадий I по UICC; TNM T2N0M0; без регионални или отдалечени метастази)
Синоними
HROC24x

Документи

HROC24 T1 M1

Cell line · Номер на продукта 300813

This is one of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from PDTx (Patient-derived Tumor xenografts) since 2006.

€800.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание
Това е една от сериите туморни клетъчни линии, създадени от д-р Михаел Линебахер от PDTx (ксенографти, получени от пациенти) от 2006 г. насам.
Тъкан
Дебело черво, създадено от PDx (ксенографт, получен от пациент) на първична тъкан на CRC (Colon ascendens, UICC I, TNM стадий T2N0M0R0L0V1, степен G2). Lk(n) + 0, Σ Lk(n) 13
Заболяване
Епителиален
Място на метастазите
Неприложимо (стадий I по UICC; TNM T2N0M0; без регионални или отдалечени метастази)
Приложения
Изследвания в областта на колоректалния рак; моделиране на колоректален рак с висока микросателитна нестабилност (MSI-H); биология на колоректалния рак, обусловена от мутацията BRAF V600E; биология на колоректалния рак в ранен стадий; прогнозиране на отговора към имунотерапия; изследвания на колоректалния рак, основани на PDx; проучвания с биобанки, съобразени с пациенти с HROC
Синоними
  • HROC24x

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived MSI-H CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Малки клетки в колонии
Тип клетка
Епителни клетки
Туморогенен
Да, при имуносупресирани голи мишки
Плоидност
Еуплоидни
Статус на MSI
MSI-H
Време за удвояване
20 часа

04Идентификатори

Източник
HROC24 T1 M1 (каталожен номер 300813 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1U80

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
APCmut, p53wt, K-Raswt, N-Raswt, H-Ras wt , B-RAFV600E, PIK3CAwt
Вируси
Не съдържа човешки патогенни вируси SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/см2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
Много бързо
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
98 години
Етническа принадлежност
Кавказки