Tartalomra ugrás
Caco-2 sejtek
Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumentumok

Caco-2 sejtek

Cell line · Termékszám 300137

A Caco-2 sejtek az emberi bélbarrier fejlett in vitro modelljeként szolgálnak, elsősorban azért, mert olyan sejtmonoréteggé differenciálódnak, amely bezárja...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Caco-2 sejtek a humán bélgát fejlett in vitro modelljeként szolgálnak, elsősorban azért, mert olyan sejtmonoréteggé differenciálódnak, amely nagyon hasonlít a vékonybélben található enterocitákra. A Caco2 sejtvonal polikarbonát szűrővel ellátott szövettenyésztési szűrőbetéteken történő tenyésztésekor a Caco-2 sejtek spontán differenciálódnak. A Caco2 sejtek differenciálódása specializált sejttípusok kifejeződését eredményezi, mikrovillákkal, enzimekkel és transzporterekkel kiegészítve, párhuzamosan az in vivo helyzetben található komplex jellemzőkkel és mechanizmusokkal.

A bélabszorpciós vizsgálatok modelljeivel összefüggésben a Caco-2 sejtek, amelyek egy humán vastagbél adenokarcinómás betegből származnak, fontos szerepet játszanak, mivel képesek magas TEER-értékek kialakítására, ami intakt szoros kötéseket és epiteliális barrierfunkciót jelez. Ezek a tulajdonságok döntő fontosságúak az olyan vizsgálatokhoz, mint a koleszterin efflux vizsgálat, valamint a sejtszállítással kapcsolatos vizsgálatokhoz, beleértve a lipid nanorészecskék mozgását és a fehérje kölcsönhatások kimutatását.

A Caco-2 sejtek kulcsfontosságúak a bélrendszeri felszívódási vizsgálatokban, mivel megbízható in vitro közelítést nyújtanak a bélhámhoz. Ezek a sejtek a bél enterocitákat utánozva, a bélgát szimulálásával megkönnyítik az orális gyógyszerfelszívódás elemzését. A kutatók a Caco-2 sejteket arra használják, hogy megjósolják, hogyan haladnak át az anyagok a bélnyálkahártyán, ami elengedhetetlen az orális gyógyszerek farmakokinetikai profiljának meghatározásához. Továbbá kulcsfontosságú eszköznek számítanak a bélrendszeri koleszterinfelvétel, homeosztázis és transzport vizsgálatában, amelyek létfontosságú folyamatok a lipidanyagcsere és a kapcsolódó betegségek megértéséhez.

A Caco-2 sejtek továbbra is a vastagbélrák és a toxikológiai kutatások sarokkövei, nemcsak a humán gyomor-bélrendszeri vizsgálatok szempontjából, hanem azért is, mert részletes betekintést nyújtanak az epeúti útvonalba, a xenobiotikumok metabolizmusába a vastagbélben, a rák és a toxikológiai kutatásokba.

Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Alkalmazások
A GI (gasztrointesztinális) traktus modellje, a transzepithelialis/endothelialis elektromos ellenállás (TEER) mérése. A Caco-2 sejtek magas, akár 2000 cm2 -es TEER-értékeket fejlesztenek ki (CLS-sel mérve a CellZscope, nanoAnalytics, Münster, Németország).
Szinonimák
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egereken. Mérsékelten jól differenciált adenokarcinómákat képeznek, amelyek megfelelnek a vastagbél elsődleges (II. fokozatú) kolon primerének
Ploidiaállapot
(P14), hipertetraploid
MSI állapot
Stabil (MSS)
Kettőzési idő
60-70 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
CaCo-2 (Cytion katalógusszám: 300137)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Hőstabil enterotoxin (Sta, E. coli), epidermális növekedési faktor (EGF), retinsavkötő fehérje I és retinolkötő fehérje II, keratin pozitív.
Antigén-expresszió
O vércsoport, Rh+, HLA II. osztály negatív
Izoenzimek
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Vírusrezisztencia
Humán immunhiányos vírus (HIV, LAV)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt 90%-os konfluens monoréteget eredményez.
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
72 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi