Tartalomra ugrás
HCT116 sejtek
Szövet
Colorectalis
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Dokumentumok

HCT116 sejtek

Cell line · Termékszám 300195

A vastagbélrákos betegből izolált HCT116 sejtek döntő szerepet játszanak a terápiás vizsgálatokban és a gyógyszerszűrésekben, különösen a vastagbélrák kutatásában...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A vastagbélrákos betegből izolált HCT116 sejtek kulcsfontosságú szerepet játszanak a terápiás vizsgálatokban és a gyógyszerszűrésekben, különösen a vastagbélrák kutatásában. A HCT-116 sejtek a KRAS proto-onkogén 13-as kodonjában található mutációról ismertek, ami kiemeli hasznosságukat a génterápiás kutatásokban, különösen mivel vírusvektorokkal történő transzfekcióra alkalmasak. Az apoptózis kutatásában a HCT116 sejtek kulcsfontosságúak az apoptózis és a sejthalál mechanizmusainak tanulmányozásában.

A butirát, egy rövid szénláncú zsírsav hatását széles körben vizsgálták HCT116 sejteken, és kiderült, hogy a butirát apoptózis indukálásával gátolja a vastagbélrák proliferációját, ami rávilágít a bonyolult rák-sejt kölcsönhatásra és a rákkutatás szélesebb körű következményeire. A butirát szerepe a génexpressziós változások modulálásában és az endoplazmatikus retikulum stresszválasz indukálásában a HCT116 sejtekben aláhúzza a vastagbélrákos sejtvonalak sejtkomplexitását.

A HCT116 vastagbélráksejtek és az olyan terápiás szerek közötti kölcsönhatás, mint a metformin, amely örökölt hatásáról és a rákkockázat csökkentésének lehetőségéről ismert, jelentős érdeklődésre tart számot. A metformin hatása a HCT116 vastagbélsejtek proliferációjára, a p21 fehérjeszint modulációjára, valamint a proliferációra és növekedésre gyakorolt tágabb értelemben vett hatásai betekintést nyújtanak a primer tumorok kezelésébe, valamint a daganatok és áttétek megelőzésébe.

A HCT116 sejtek felbecsülhetetlen értékűek az onkológiai kutatások számára, mivel kritikus betekintést nyújtanak a terápiák hatékonyságába és a rák progressziójának molekuláris dinamikájába. A figyelemre méltó KRAS-mutációval és a transzfekcióra való fogékonysággal ezek a sejtek megkönnyítik a génterápiás vizsgálatokat, az apoptózis elemzését, valamint a vastagbélrák kezelését és megelőzési stratégiáit.

Szövet
Colorectalis
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben (5-10 x 106 sejt beoltása)
Ploidiaállapot
Aneuploid
MSI állapot
Instabil (MSI-magas)
Kariotípus
A HCT116 sejtek kariotípusa közel diploid, a sejtek 70%-a 45 kromoszómát tartalmaz, gyakran a 8., 10., 16. és 17. kromoszómák felülreprezentáltságát mutatja a hosszú karokon, valamint az Y-kromoszóma hiányát.
Kettőzési idő
25-35 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HCT116 (Cytion katalógusszám: 300195)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
A sejtek immunoperoxidáz festéssel keratinra pozitívak. A HCT 116 sejtek pozitívak a transzformáló növekedési faktor béta 1 (TGF béta 1) és béta 2 (TGF béta 2) expressziójára.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükóz, w: stabil glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám: 820200a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 1-2 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
3 nap
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
48 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi