الانتقال إلى المحتوى
خلايا HCT116
الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

المستندات

خلايا HCT116

Cell line · رقم المنتج 300195

تلعب خلايا HCT116، التي تم عزلها من مريض مصاب بسرطان القولون، دورًا حاسمًا في الدراسات العلاجية واختبارات فحص الأدوية، لا سيما في أبحاث سرطان القولون...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تؤدي خلايا HCT116، التي تم عزلها من مريض بسرطان القولون، دورًا حاسمًا في الدراسات العلاجية وفحوصات الأدوية، خاصة في أبحاث سرطان القولون. وتُعرف خلايا HCT-116 بوجود طفرة في الكودون 13 من الجين البروتيني KRAS، مما يسلط الضوء على فائدتها في أبحاث العلاج الجيني، خاصةً أنها قابلة للنقل بالنواقل الفيروسية. في أبحاث موت الخلايا المبرمج، تعتبر خلايا HCT116 محورية لدراسة آليات موت الخلايا المبرمج وموت الخلايا.

وقد تمت دراسة تأثيرات الزبدات، وهو حمض دهني قصير السلسلة، على نطاق واسع في خلايا HCT116، مما كشف أن الزبدات تمنع تكاثر سرطان القولون عن طريق تحفيز موت الخلايا المبرمج مما يسلط الضوء على التفاعل المعقد بين الخلايا السرطانية والآثار الأوسع نطاقًا لأبحاث السرطان. يؤكد دور الزبدات في تعديل تغيرات التعبير الجيني وتحفيز استجابة إجهاد الشبكة الإندوبلازمية في خلايا HCT116 على التعقيد الخلوي في خطوط خلايا سرطان القولون والمستقيم.

كما أن التفاعل بين خلايا سرطان القولون HCT116 والعوامل العلاجية مثل الميتفورمين، المعروف بتأثيره القديم وقدرته على الحد من خطر الإصابة بالسرطان، له أهمية كبيرة. يوفر تأثير الميتفورمين على تكاثر خلايا القولون HCT116 وتعديل مستوى بروتين p21 وآثاره الأوسع نطاقاً على الانتشار والنمو رؤى حول إدارة الأورام الأولية والوقاية من الأورام والانبثاث.

تُعد خلايا HCT116 ذات قيمة لا تُقدّر بثمن بالنسبة لأبحاث الأورام، حيث توفر رؤى مهمة حول فعالية العلاجات والديناميكيات الجزيئية لتطور السرطان. وبفضل وجود طفرة ملحوظة في طفرة KRAS وقابلية نقل الجينات، تسهل هذه الخلايا دراسات العلاج الجيني وتحليل موت الخلايا المبرمج واستراتيجيات علاج سرطان القولون والمستقيم والوقاية منه.

الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية (لقاح من 5-10 × 106 خلية)
حالة البلويدية
أنيوبلويد
حالة MSI
غير مستقر (MSI-high)
النمط الكروموسومي
يكون النمط النووي لخلايا HCT116 ثنائي الصبغيات تقريبًا، حيث تحتوي 70% من الخلايا على 45 كروموسومًا، وغالبًا ما يظهر تمثيل زائد للكروموسومات 8 و10 و16 و17 على الأذرع الطويلة، إلى جانب غياب كروموسوم Y.
زمن المضاعفة
من 25 إلى 35 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HCT116 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300195)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0291

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
تكون الخلايا إيجابية بالنسبة للكيراتين عن طريق تلوين الكيراتين بواسطة التلوين المناعي. خلايا HCT 116 إيجابية لتعبير عامل النمو المتحول بيتا 1 (TGF بيتا 1) وبيتا 2 (TGF بيتا 2).

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
1 إلى 2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
3 أيام
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
48 سنة
الأصل العرقي
قوقازي