Přejít na obsah
Buňky HCT116
Tkáň
Kolorektální
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Dokumenty

Buňky HCT116

Cell line · Číslo výrobku 300195

Buňky HCT116, izolované od pacienta s rakovinou tlustého střeva, hrají klíčovou roli v terapeutických studiích a při screeningu léčiv, zejména ve výzkumu rakoviny tlustého střeva...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky HCT116, izolované z pacienta s rakovinou tlustého střeva, hrají klíčovou roli v terapeutických studiích a při testování léčiv, zejména ve výzkumu rakoviny tlustého střeva. Buňky HCT-116 jsou rozpoznatelné pro mutaci v kodonu 13 protoonkogenu KRAS, což zdůrazňuje jejich užitečnost ve výzkumu genové terapie, zejména proto, že jsou vhodné pro transfekci virovými vektory. Ve výzkumu apoptózy jsou buňky HCT116 klíčové pro studium mechanismů apoptózy a buněčné smrti.

Účinky butyrátu, mastné kyseliny s krátkým řetězcem, byly důkladně studovány na buňkách HCT116, přičemž bylo zjištěno, že butyrát inhibuje proliferaci rakoviny tlustého střeva tím, že indukuje apoptózu, což poukazuje na složitou interakci mezi rakovinou a buňkou a širší důsledky pro výzkum rakoviny. Úloha butyrátu při modulaci změn genové exprese a indukci stresové reakce endoplazmatického retikula v buňkách HCT116 podtrhuje složitost buněčných linií kolorektálního karcinomu.

Významný zájem vzbuzuje interakce mezi buňkami rakoviny tlustého střeva HCT116 a terapeutickými látkami, jako je metformin, který je známý svým dědičným účinkem a potenciálem snižovat riziko vzniku rakoviny. Vliv metforminu na proliferaci buněk tlustého střeva HCT116, modulaci hladiny proteinu p21 a jeho širší důsledky na proliferaci a růst nabízejí pohled na léčbu primárních nádorů a prevenci vzniku nádorů a metastáz.

Buňky HCT116 jsou neocenitelné pro onkologický výzkum, protože poskytují zásadní poznatky o účinnosti terapeutik a molekulární dynamice progrese rakoviny. Díky významné mutaci KRAS a náchylnosti k transfekci usnadňují tyto buňky studie genové terapie, analýzu apoptózy a strategie léčby a prevence kolorektálního karcinomu.

Tkáň
Kolorektální
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší (inokulum 5-10 x 106 buněk)
Ploidní stav
Aneuploidní
Stav MSI
Nestabilní (MSI-high)
Karyotyp
Karyotyp buněk HCT116 je téměř diploidní, 70 % buněk nese 45 chromozomů, často s nadměrným zastoupením chromozomů 8, 10, 16 a 17 na dlouhých ramenech a s absencí chromozomu Y.
Doba zdvojnásobení
25 až 35 hodin

04Identifikátory

Citace
HCT116 (katalogové číslo Cytion 300195)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Buňky jsou pozitivní na keratin při barvení imunoperoxidázou. Buňky HCT 116 jsou pozitivní na expresi transformujícího růstového faktoru beta 1 (TGF beta 1) a beta 2 (TGF beta 2).

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
48 let
Etnická příslušnost
Kavkazský