Buňky Caco-2

Buňky Caco-2 slouží jako pokročilý in vitro model lidské střevní bariéry, především díky své diferenciaci do buněčné monovrstvy, která se velmi podobá enterocytům vystýlajícím tenké střevo. Při kultivaci buněčné linie Caco-2 na filtračních vložkách pro tkáňové kultury s polykarbonátovými filtry dochází ke spontánní diferenciaci buněk Caco-2. Diferenciace buněk Caco2 vede k expresi specializovaných buněčných typů, doplněných o mikroklky, enzymy a přenašeče, což odpovídá komplexním vlastnostem a mechanismům, které se vyskytují v situaci in vivo.

V kontextu modelů pro studium střevní absorpce jsou buňky Caco-2, které byly odvozeny z lidského pacienta s kolorektálním adenokarcinomem, užitečné díky své schopnosti vyvinout vysoké hodnoty TEER, což znamená neporušené těsné spoje a funkci epiteliální bariéry. Tyto vlastnosti jsou klíčové pro testy, jako je test na výtok cholesterolu, a pro výzkum buněčného transportu, včetně pohybu lipidových nanočástic a detekce interakcí proteinů.

Buňky Caco-2 jsou klíčové pro studie střevní absorpce, protože poskytují spolehlivou in vitro aproximaci střevního epitelu. Tyto buňky napodobují střevní enterocyty a usnadňují analýzy perorální absorpce léčiv tím, že simulují střevní bariéru. Vědci využívají buňky Caco-2 k předpovědi, jak látky procházejí střevní sliznicí, což je nezbytné pro farmakokinetické profilování perorálních léčiv. Kromě toho jsou klíčovým nástrojem při zkoumání střevního příjmu, homeostázy a transportu cholesterolu, což jsou zásadní procesy pro pochopení metabolismu lipidů a souvisejících onemocnění.

Buňky Caco-2 zůstávají základním kamenem výzkumu karcinomu tlustého střeva a toxikologie, a to nejen pro svůj význam pro studium lidského gastrointestinálního traktu, ale také pro svou úlohu při poskytování podrobných poznatků o žlučové dráze, metabolismu xenobiotik v tlustém střevě, výzkumu rakoviny a toxikologie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení