.jpg)
- Tisu
- Usus besar
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Sinonim
- CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II
Dokumen
Sel Caco-2
Cell line · Nomor produk 300137
Sel Caco-2 berfungsi sebagai model in vitro yang canggih untuk sawar usus manusia, terutama karena kemampuannya berdiferensiasi menjadi lapisan tunggal sel yang menutup...
Penyesuaian / Rekomendasi
- Sel Caco-2Cell line€430.00
01Informasi umum
- Deskripsi
Sel Caco-2 berfungsi sebagai model in vitro canggih untuk penghalang usus manusia, terutama karena diferensiasinya menjadi monolayer sel yang sangat mirip dengan enterosit yang melapisi usus kecil. Ketika membiakkan garis sel Caco2 pada sisipan filter kultur jaringan dengan filter polikarbonat, sel Caco-2 mengalami diferensiasi spontan. Diferensiasi sel Caco2 menghasilkan ekspresi jenis sel khusus, lengkap dengan mikrovili, enzim, dan transporter, yang sejajar dengan fitur dan mekanisme kompleks yang ditemukan dalam situasi in vivo.
Dalam konteks model studi penyerapan usus, sel Caco-2, yang berasal dari pasien adenokarsinoma kolorektal manusia, sangat penting karena kemampuannya untuk mengembangkan nilai TEER yang tinggi, yang menandakan persimpangan yang utuh dan fungsi penghalang epitel. Sifat-sifat ini sangat penting untuk pengujian seperti uji eflux kolesterol dan investigasi transportasi seluler, termasuk pergerakan nanopartikel lipid dan deteksi interaksi protein.
Sel Caco-2 sangat penting untuk studi penyerapan usus, memberikan perkiraan in vitro yang dapat diandalkan dari epitel usus. Meniru enterosit usus, sel-sel ini memfasilitasi analisis penyerapan obat oral dengan mensimulasikan penghalang usus. Para peneliti menggunakan sel Caco-2 untuk memprediksi bagaimana zat-zat melintasi mukosa usus, yang sangat penting untuk profil farmakokinetik obat oral. Selain itu, sel ini merupakan alat utama dalam menyelidiki penyerapan kolesterol usus, homeostasis, dan transportasi, yang merupakan proses penting untuk memahami metabolisme lipid dan penyakit terkait.
Sel Caco-2 tetap menjadi landasan dalam penelitian karsinoma usus besar dan toksikologi, tidak hanya karena relevansinya dengan penelitian gastrointestinal manusia tetapi juga karena perannya dalam memberikan wawasan terperinci tentang jalur empedu, metabolisme xenobiotik di dalam usus besar, penelitian kanker, dan toksikologi.
- Tisu
- Usus besar
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Aplikasi
- Model saluran pencernaan (gastrointestinal), pengukuran Trans-Epithelial/Endothelial Eletrical Resistance (TEER). Sel Caco-2 mengembangkan nilai TEER yang tinggi hingga 2000 cm2 (sebagaimana diukur oleh CLS menggunakan CellZscope, nanoAnalytics, Münster, Jerman).
- Sinonim
- CaCo-2
- CACO-2
- Caco 2
- CACO 2
- CACO2
- CaCo2
- CaCO2
- Caco2
- Caco-II
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Tumorigenik
- Ya, pada tikus telanjang. Membentuk adenokarsinoma yang berdiferensiasi cukup baik yang konsisten dengan kolon primer (grade II)
- Status ploidi
- (P14), hipertetraploid
- Status MSI
- Stabil (MSS)
- Waktu penggandaan
- 60 hingga 70 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- CaCo-2 (nomor katalog Cytion 300137)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0025
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- Enterotoksin stabil panas (Sta, E. coli), faktor pertumbuhan epidermal (EGF), protein pengikat asam retinoat I dan protein pengikat retinol II, keratin positif.
- Ekspresi antigen
- Golongan Darah O, Rh+, HLA kelas II negatif
- Isoenzim
- Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
- Ketahanan terhadap virus
- Virus imunodefisiensi manusia (HIV, LAV)
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm² akan menghasilkan lapisan tunggal yang padat 90% dalam waktu sekitar 4 hari.
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 72 tahun
- Etnis
- Kaukasia
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
