Pāriet uz saturu
Caco-2 šūnas
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumenti

Caco-2 šūnas

Cell line · Preces numurs 300137

Caco-2 šūnas kalpo kā uzlabots in vitro cilvēka zarnu barjeras modelis, galvenokārt tāpēc, ka tās diferenciējas šūnu monoslānī, kas noslēdzas...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Caco-2 šūnas kalpo kā moderns cilvēka zarnu barjeras in vitro modelis, galvenokārt tāpēc, ka tās diferencējas šūnu monoslānī, kas ir ļoti līdzīgs tievo zarnu gļotādas enterocytiem. Kultivējot Caco-2 šūnu līniju uz audu kultūru filtru ieliktņiem ar polikarbonāta filtriem, Caco-2 šūnas spontāni diferencējas. Caco2 šūnu diferenciācijas rezultātā veidojas specializēti šūnu tipi ar mikrovilielām, enzīmiem un transportētājiem, kas atbilst sarežģītām iezīmēm un mehānismiem, kas sastopami in vivo apstākļos.

Saistībā ar zarnu absorbcijas pētījumu modeļiem Caco-2 šūnas, kas iegūtas no cilvēka kolorektālās adenokarcinomas pacienta, ir ļoti noderīgas, jo tās spēj sasniegt augstas TEER vērtības, kas liecina par neskartiem hermētiskiem savienojumiem un epitēlija barjeras funkciju. Šīs īpašības ir ļoti svarīgas tādiem testiem kā holesterīna izplūdes tests un pētījumi par šūnu transportu, tostarp lipīdu nanodaļiņu kustību un proteīnu mijiedarbības noteikšanu.

Caco-2 šūnas ir ļoti svarīgas zarnu uzsūkšanās pētījumos, jo tās nodrošina uzticamu zarnu epitēlija in vitro tuvinājumu. Imitējot zarnu enterocītus, šīs šūnas atvieglo zāļu absorbcijas analīzi iekšķīgi, imitējot zarnu barjeru. Pētnieki izmanto Caco-2 šūnas, lai prognozētu, kā vielas šķērso zarnu gļotādu, kas ir būtiski perorāli lietojamo zāļu farmakokinētiskajai profilēšanai. Turklāt tās ir galvenais rīks holesterīna uzņemšanas, homeostāzes un transportēšanas pētniecībā zarnās, kas ir būtiski procesi, lai izprastu lipīdu metabolismu un ar to saistītās slimības.

Caco-2 šūnas joprojām ir stūrakmens resnās zarnas karcinomas un toksikoloģijas pētījumos ne tikai tāpēc, ka tās ir nozīmīgas cilvēka kuņģa un zarnu trakta pētījumos, bet arī tāpēc, ka tās sniedz detalizētu ieskatu par žultsceļu, ksenobiotiku metabolismu resnajā zarnā, vēža un toksikoloģijas pētījumos.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Pieteikumi
Kuņģa un zarnu trakta modelis, transepiteliālās/endotēlija elektriskās pretestības (TEER) mērīšana. Caco-2 šūnām ir augstas TEER vērtības līdz pat 2000 cm2 (izmērīts ar CLS, izmantojot CellZscope, nanoAnalytics, Minstere, Vācija).
Sinonīmi
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm. Veidojas vidēji labi diferencētas adenokarcinomas, kas atbilst kolīta primārajām (II pakāpes)
Ploidijas statuss
(P14), hipertetraploīds
MSI statuss
Stabils (MSS)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
60 līdz 70 stundas

04Identifikatori

Atsauce
CaCo-2 (Cytion kataloga numurs 300137)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Termiski stabils enterotoksīns (Sta, E. coli), epidermālais augšanas faktors (EGF), retinoskābi saistošais proteīns I un retinolu saistošais proteīns II, keratīns pozitīvs.
Antigēna ekspresija
O asinsgrupa, Rh+, HLA II klase negatīva
Izoenzīmi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Izturība pret vīrusiem
Cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV, LAV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 radīs 90 % konfluentu monoslāni aptuveni 4 dienu laikā.
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
72 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis