Células Caco-2

As células Caco-2 servem como um modelo in vitro avançado para a barreira intestinal humana, principalmente devido à sua diferenciação em uma monocamada celular que se assemelha muito aos enterócitos que revestem o intestino delgado. Ao cultivar a linhagem celular Caco-2 em insertos de cultura de tecidos com filtros de policarbonato, as células Caco-2 passam por uma diferenciação espontânea. A diferenciação das células Caco-2 resulta na expressão de tipos celulares especializados, completos com microvilosidades, enzimas e transportadores, refletindo as características e mecanismos complexos encontrados em uma situação in vivo.

No contexto de modelos de estudos de absorção intestinal, as células Caco-2, derivadas de um paciente com adenocarcinoma colorretal humano, são fundamentais devido à sua capacidade de desenvolver altos valores de TEER, o que indica junções estreitas intactas e função de barreira epitelial. Essas propriedades são cruciais para ensaios como o de efluxo de colesterol e investigações sobre transporte celular, incluindo o movimento de nanopartículas lipídicas e a detecção de interações proteicas.

As células Caco-2 são fundamentais para estudos de absorção intestinal, fornecendo uma aproximação in vitro confiável do epitélio intestinal. Imitando os enterócitos intestinais, essas células facilitam as análises da absorção de medicamentos por via oral ao simular a barreira intestinal. Pesquisadores utilizam as células Caco-2 para prever como as substâncias atravessam a mucosa intestinal, o que é essencial para o perfil farmacocinético de medicamentos orais. Além disso, elas são uma ferramenta fundamental na investigação da captação, homeostase e transporte do colesterol no intestino, processos vitais para a compreensão do metabolismo lipídico e das doenças associadas.

As células Caco-2 continuam sendo um pilar fundamental na pesquisa sobre carcinoma de cólon e toxicologia, não apenas por sua relevância para estudos gastrointestinais em humanos, mas também por seu papel em fornecer insights detalhados sobre a via biliar, o metabolismo de xenobióticos no cólon, bem como na pesquisa sobre câncer e toxicologia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.