.jpg)
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II
Documents
01General information
- Description
תאי Caco-2 משמשים כמודל מתקדם במבחנה למחסום המעי האנושי, בעיקר בשל התמיינותם לשכבת תאים אחת הדומה מאוד לאנטרוציטים המצפים את המעי הדק. כאשר מגדלים את קו התאים Caco2 על מסנני תרבות רקמה עם מסנני פוליקרבונט, תאי Caco-2 עוברים התמיינות ספונטנית. ההתמיינות של תאי Caco2 מובילה לביטוי של סוגי תאים מיוחדים, הכוללים מיקרו-וילי, אנזימים ומובילי חומרים, בדומה לתכונות ולמנגנונים המורכבים הקיימים במצב in vivo.
בהקשר של מודלים למחקרי ספיגה במעי, תאי Caco-2, שמקורם בחולה אדנוקרצינומה של המעי הגס, הם בעלי חשיבות מכרעת בשל יכולתם לפתח ערכי TEER גבוהים, המעידים על חיבורים הדוקים תקינים ותפקוד מחסום אפיתל. תכונות אלה הן חיוניות לבדיקות כמו בדיקת זרימת כולסטרול ומחקרים על הובלה תאית, כולל תנועת ננו-חלקיקים שומניים וזיהוי אינטראקציות חלבוניות.
תאי Caco-2 הם חיוניים למחקרים על ספיגה במעיים, ומספקים קירוב אמין במבחנה לאפיתל המעי. תאים אלה, המדמים את האנטרוציטים במעיים, מקלים על ניתוח ספיגת תרופות דרך הפה על ידי הדמיית מחסום המעי. חוקרים משתמשים בתאי Caco-2 כדי לחזות כיצד חומרים עוברים את רירית המעי, דבר חיוני לפרופיל הפרמקוקינטי של תרופות אוראליות. בנוסף, הם מהווים כלי מרכזי בחקר ספיגת הכולסטרול במעי, הומאוסטזיס והובלה, תהליכים חיוניים להבנת חילוף החומרים של השומנים ומחלות נלוות.
תאי Caco-2 נותרים אבן יסוד במחקר סרטן המעי הגס וטוקסיקולוגיה, לא רק בשל הרלוונטיות שלהם למחקרים במערכת העיכול האנושית, אלא גם בשל תפקידם במתן תובנות מפורטות על מסלול המרה, חילוף החומרים של חומרים זרים במעי הגס, סרטן ומחקר טוקסיקולוגיה.
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Applications
- מודל של מערכת העיכול (GI), מדידת ההתנגדות החשמלית הטרנס-אפיתליאלית/אנדותלית (TEER). תאי Caco-2 מפתחים ערכי TEER גבוהים של עד 2000 סמ"ר (כפי שנמדד על ידי CLS באמצעות CellZscope, nanoAnalytics, Münster, גרמניה).
- Synonyms
- CaCo-2
- CACO-2
- Caco 2
- CACO 2
- CACO2
- CaCo2
- CaCO2
- Caco2
- Caco-II
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים. יוצרים אדנוקרצינומות מובחנות במידה בינונית, התואמות את הגידול הראשוני במעי הגס (דרגה II)
- Ploidy status
- (P14), היפרטטראפלואיד
- MSI status
- יציב (MSS)
- Doubling time
- 60 עד 70 שעות
04Identifiers
- Citation
- CaCo-2 (מספר קטלוגי Cytion 300137)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0025
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- אנטרוטוקסין יציב בחום (Sta, E. coli), גורם גדילה אפידרמלי (EGF), חלבון קושר חומצה רטינואית I וחלבון קושר רטינול II, חיובי לקרטין.
- Antigen expression
- סוג דם O, Rh+, HLA סוג II שלילי
- Isoenzymes
- Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
- Virus resistance
- נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV, LAV)
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית צפופה ב-90% תוך כ-4 ימים.
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 72 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes

