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- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II
Documents
01General information
- Description
Caco-2 細胞作為人類腸道屏障的先進體外模型，主要歸因於其能分化為一層與小腸內襯腸上皮細胞極為相似的單層細胞。當在配備聚碳酸酯濾膜的組織培養濾膜嵌件上培養 Caco-2 細胞系時，Caco-2 細胞會發生自發性分化。 Caco-2 細胞的分化會導致其表現出特化的細胞類型，具備微絨毛、酵素及轉運蛋白，與體內環境中發現的複雜特徵和機制相呼應。
在腸道吸收研究模型中，源自人類結直腸腺癌患者的 Caco-2 細胞至關重要，因為它們能夠產生高 TEER 值，這意味著緊密連接和上皮屏障功能完好無損。 這些特性對於膽固醇外流測定等實驗，以及細胞轉運研究（包括脂質奈米粒子的移動與蛋白質相互作用的檢測）至關重要。
Caco-2 細胞對於腸道吸收研究至關重要，能提供可靠的體外腸上皮模擬環境。這些細胞模擬腸道腸上皮細胞，透過重現腸道屏障來協助分析口服藥物吸收。 研究人員利用 Caco-2 細胞預測物質如何穿越腸黏膜，這對於口服藥物的藥代動力學分析至關重要。此外，它們還是研究腸道膽固醇攝取、穩態與轉運的關鍵工具，這些過程對於理解脂質代謝及相關疾病至關重要。
Caco-2 細胞仍是結腸癌與毒理學研究的基石，不僅因其與人類胃腸道研究的相關性，更因其能深入闡明膽道途徑、結腸內異物代謝，以及在癌症與毒理學研究中的作用。
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Applications
- 胃腸道（GI）模型，跨上皮／內皮電阻（TEER）測量。 Caco-2 細胞會產生高達 2000 cm² 的 TEER 數值（由 CLS 採用 CellZscope 儀器測量，nanoAnalytics，德國明斯特）。
- Synonyms
- CaCo-2
- CACO-2
- Caco 2
- CACO 2
- CACO2
- CaCo2
- CaCO2
- Caco2
- Caco-II
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上。會形成分化程度中等、與結腸原發性腺癌（II 級）相符的腺癌。
- Ploidy status
- (P14)，超四倍體
- MSI status
- 穩定版 (MSS)
- Doubling time
- 60 至 70 小時
04Identifiers
- Citation
- CaCo-2（Cytion 型號 300137）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0025
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- 熱穩定性腸毒素（Sta，大腸桿菌）、表皮生長因子（EGF）、視黃酸結合蛋白 I 及視黃醇結合蛋白 II，角蛋白呈陽性。
- Antigen expression
- O型血，Rh陽性，HLA II類陰性
- Isoenzymes
- Me-2，1；PGM3，1；PGM1，1；ES-D，1；AK-1，1；GLO-1，1；G6PD，B。
- Virus resistance
- 人類免疫缺陷病毒（HIV，LAV）
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm² 將在約 4 天內形成 90% 融合的單層細胞
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 72年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
