Células Caco-2

Las células Caco-2 sirven como un modelo in vitro avanzado de la barrera intestinal humana, principalmente debido a su diferenciación en una monocapa celular que se asemeja mucho a los enterocitos que recubren el intestino delgado. Al cultivar la línea celular Caco-2 en insertos de filtro para cultivo de tejidos con filtros de policarbonato, las células Caco-2 experimentan una diferenciación espontánea. La diferenciación de las células Caco-2 da lugar a la expresión de tipos celulares especializados, con microvellosidades, enzimas y transportadores, lo que refleja las características y mecanismos complejos que se observan en una situación in vivo.

En el contexto de los modelos de estudios de absorción intestinal, las células Caco-2, derivadas de un paciente con adenocarcinoma colorrectal humano, son fundamentales debido a su capacidad para desarrollar altos valores de TEER, lo que indica que las uniones estrechas y la función de barrera epitelial están intactas. Estas propiedades son cruciales para ensayos como el de eflujo de colesterol y para investigaciones sobre el transporte celular, incluyendo el movimiento de nanopartículas lipídicas y la detección de interacciones proteicas.

Las células Caco-2 son fundamentales para los estudios de absorción intestinal, ya que proporcionan una aproximación in vitro confiable del epitelio intestinal. Al imitar a los enterocitos intestinales, estas células facilitan los análisis de la absorción de fármacos por vía oral al simular la barrera intestinal. Los investigadores utilizan las células Caco-2 para predecir cómo las sustancias atraviesan la mucosa intestinal, lo cual es esencial para el perfil farmacocinético de los medicamentos orales. Además, son una herramienta clave para investigar la captación, la homeostasis y el transporte intestinal del colesterol, procesos vitales para comprender el metabolismo de los lípidos y las enfermedades asociadas.

Las células Caco-2 siguen siendo un pilar fundamental en la investigación del carcinoma de colon y la toxicología, no solo por su relevancia para los estudios gastrointestinales en humanos, sino también por su papel al brindar información detallada sobre la vía biliar, el metabolismo de los xenobióticos en el colon, así como en la investigación sobre el cáncer y la toxicología.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.