Przejdź do treści
Komórki Caco-2
Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumenty

Komórki Caco-2

Cell line · Numer produktu 300137

Komórki Caco-2 stanowią zaawansowany model in vitro bariery jelitowej człowieka, przede wszystkim ze względu na ich różnicowanie się w monowarstwę komórkową, która tworzy...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki Caco-2 służą jako zaawansowany model in vitro dla ludzkiej bariery jelitowej, głównie ze względu na ich różnicowanie do monowarstwy komórkowej, która ściśle przypomina enterocyty wyściełające jelito cienkie. Podczas hodowli linii komórkowej Caco2 na wkładach filtracyjnych do hodowli tkankowej z filtrami poliwęglanowymi, komórki Caco-2 ulegają spontanicznemu różnicowaniu. Różnicowanie komórek Caco2 skutkuje ekspresją wyspecjalizowanych typów komórek, wraz z mikrokosmkami, enzymami i transporterami, co odpowiada złożonym cechom i mechanizmom występującym w warunkach in vivo.

W kontekście modeli badań wchłaniania jelitowego, komórki Caco-2, które pochodzą od ludzkiego pacjenta z gruczolakorakiem jelita grubego, są instrumentalne ze względu na ich zdolność do osiągania wysokich wartości TEER, co oznacza nienaruszone połączenia ścisłe i funkcję bariery nabłonkowej. Właściwości te są kluczowe dla testów takich jak test wypływu cholesterolu i badań transportu komórkowego, w tym ruchu nanocząstek lipidowych i wykrywania interakcji białek.

Komórki Caco-2 odgrywają kluczową rolę w badaniach wchłaniania jelitowego, zapewniając wiarygodne przybliżenie nabłonka jelitowego in vitro. Naśladując enterocyty jelitowe, komórki te ułatwiają analizę wchłaniania leków doustnych poprzez symulację bariery jelitowej. Naukowcy wykorzystują komórki Caco-2 do przewidywania, w jaki sposób substancje przechodzą przez błonę śluzową jelit, co jest niezbędne do profilowania farmakokinetycznego leków doustnych. Co więcej, są one kluczowym narzędziem w badaniu wchłaniania, homeostazy i transportu cholesterolu w jelitach, które są istotnymi procesami dla zrozumienia metabolizmu lipidów i związanych z nim chorób.

Komórki Caco-2 pozostają kamieniem węgielnym w badaniach nad rakiem jelita grubego i toksykologią, nie tylko ze względu na ich znaczenie w badaniach nad ludzkim układem pokarmowym, ale także ze względu na ich rolę w zapewnianiu szczegółowego wglądu w szlak żółciowy, metabolizm ksenobiotyków w okrężnicy, badania nad rakiem i toksykologią.

Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Zastosowania
Model przewodu pokarmowego, pomiar przezbłonowego/śródbłonkowego oporu elektrycznego (TEER). Komórki Caco-2 rozwijają wysokie wartości TEER do 2000 cm2 (mierzone za pomocą CLS przy użyciu CellZscope, nanoAnalytics, Münster, Niemcy).
Synonimy
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy. Tworzą umiarkowanie dobrze zróżnicowane gruczolakoraki zgodne z pierwotnym rakiem okrężnicy (stopień II)
Status ploidii
(P14), hipertetraploidalny
Stan MSI
Stabilny (MSS)
Czas podwojenia
60 do 70 godzin

04Identyfikatory

Źródło
CaCo-2 (numer katalogowy Cytion 300137)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Termostabilna enterotoksyna (Sta, E. coli), naskórkowy czynnik wzrostu (EGF), białko wiążące kwas retinowy I i białko wiążące retinol II, keratyna dodatnia.
Ekspresja antygenu
Grupa krwi O, Rh+, HLA klasa II ujemna
Izoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Odporność na wirusy
Ludzki wirus niedoboru odporności (HIV, LAV)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie 90% zlewającej się monowarstwy w ciągu około 4 dni.
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
72 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski