Przejdź do treści
Komórki HT-29
Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
HT 29, HT29

Dokumenty

Komórki HT-29

Cell line · Numer produktu 300215

Linia komórkowa HT-29, wyhodowana z ludzkiego gruczolakoraka jelita grubego stopnia II, stanowi podstawowy model badawczy w badaniach nad nowotworami jelita grubego u ludzi....

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HT-29, pochodząca z ludzkiego gruczolakoraka jelita grubego stopnia II, stanowi kamień węgielny w badaniach nad ludzkimi nowotworami jelita grubego. Uzyskane z guza pierwotnego u 44-letniej kobiety w 1964 roku, komórki HT22 odegrały kluczową rolę w lepszym zrozumieniu mechanizmów adhezji i inwazji komórek nowotworowych. Jako ludzka linia komórek gruczolakoraka, komórki HT-29 wykazują cechy, które ściśle naśladują dojrzałe komórki jelitowe, takie jak enterocyty, podkreślając ich przydatność w badaniu dynamiki trawienia pokarmu i biodostępności składników odżywczych.

Komórki HT-29 są wrażliwe na konwencjonalne chemioterapeutyki raka jelita grubego, w tym 5-fluorouracyl i oksaliplatynę. Wrażliwość ta, w połączeniu z ich zdolnością do ekspresji szlaków różnicowania w określonych warunkach, takich jak niedobór glukozy lub leczenie induktorami, takimi jak maślan, czyni je nieocenionym modelem do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw różnicowania komórek i progresji raka.

Co więcej, komórki HT-29 zostały wykorzystane jako model ksenoprzeszczepu guza, zapewniając platformę do badań in vivo, które naśladują zachowanie guza w organizmie człowieka. Aplikacja ta pozwala na badanie wzrostu guza, przerzutów i skuteczności środków terapeutycznych w warunkach in vivo.

Podsumowując, linia komórkowa HT-29 jest kluczowym narzędziem w badaniach medycznych i biologicznych, ułatwiającym głębsze zrozumienie ludzkiego gruczolakoraka jelita grubego, molekularnych podstaw różnicowania komórek nowotworowych i rozwoju skutecznych metod leczenia raka.

Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
  • HT 29
  • HT29

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy. Tworzy dobrze zróżnicowanego gruczolakoraka zgodnego z pierwotnym rakiem okrężnicy (stopień I), guzy tworzą się również u chomików leczonych sterydami
Karyotyp
Liczba chromosomów linii macierzystej jest hipertriploidalna ze składnikiem 2S występującym na poziomie 2,4%. Siedemnaście chromosomów markerowych znajduje się w większości metafaz, zazwyczaj w pojedynczej kopii na chromosom. Oznaczenia markerów to: M1p-(=t(3p-,?) z usuniętym krótkim ramieniem), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, t(8q,9q-), xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ i xq-. Chromosom 13 jest nullisomiczny, a chromosomy 8 i 14 są ogólnie monosomiczne. W analizie pasm QM nie wykryto chromosomu Y.
Czas podwojenia
24 godziny

04Identyfikatory

Źródło
HT-29 (numer katalogowy Cytion 300215)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Receptor urokinazy (u-PAR), witamina D (umiarkowana ekspresja), brak wykrywalnej aktywności aktywatora plazminogenu.
Ekspresja białek
CEA ujemny, p53 dodatni
Ekspresja antygenu
Grupa krwi A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, ekspresja ceramidu galaktozy na powierzchni komórki (możliwy alternatywny receptor dla HIV)
Izoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, fenotyp produktu częstotliwości: 0.0230
Onkogeny
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Podatność na wirusy
Ludzki wirus niedoboru odporności (HIV, LAV)
Produkty
Składnik wydzielniczy IgA, antygen rakowo-płodowy (CEA), białko wiążące transformujący czynnik wzrostu beta, mucyna, nadprodukcja antygenu p53

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Powoli, komórki potrzebują około 48 godzin na osiedlenie się i przyleganie.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
44 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski