Siirry sisältöön
HT-29-solut
Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
HT 29, HT29

Asiakirjat

HT-29-solut

Cell line · Tuotenumero 300215

HT-29-solulinja, joka on peräisin ihmisen paksusuolen adenokarsinoomasta (aste II), on keskeinen tutkimusmalli ihmisen paksusuolisyövän tutkimuksessa....

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HT-29-solulinja, joka on peräisin ihmisen II-asteen paksusuolen adenokarsinoomasta, on kulmakiviä ihmisen paksusuolisyövän tutkimuksessa. HT-29-solut, jotka on johdettu 44-vuotiaan naisen primaarikasvaimesta vuonna 1964, ovat edistäneet merkittävästi syöpäsolujen tarttumis- ja invaasiomekanismien ymmärtämistä. Ihmisen adenokarsinoomasolulinjana HT-29-solut muistuttavat ominaisuuksiltaan läheisesti kypsiä suolistosoluja, kuten enterosyyttejä, mikä korostaa niiden hyödyllisyyttä ruoan sulatuksen ja ravintoaineiden biologisen hyötyosuuden dynamiikan tutkimisessa.

HT-29-solut ovat herkkiä tavanomaisille kolorektaalisyövän kemoterapioille, kuten 5-fluorourasiilille ja oksaliplatiinille. Tämä herkkyys yhdistettynä niiden kykyyn ilmentää erilaistumisreittejä tietyissä olosuhteissa, kuten glukoosin puute tai hoito induktoreilla, kuten butyraatilla, tekee niistä korvaamattoman arvokkaan mallin solujen erilaistumisen ja syövän etenemisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.

Lisäksi HT-29-soluja on käytetty ksenograft-kasvainmallina, joka tarjoaa alustan in vivo -tutkimuksille, jotka jäljittelevät kasvaimen käyttäytymistä ihmiskehossa. Tämä sovellus mahdollistaa kasvaimen kasvun, etäpesäkkeiden ja terapeuttisten aineiden tehon tutkimisen in vivo -tilanteissa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että HT-29-solulinja on keskeinen väline lääketieteellisessä ja biologisessa tutkimuksessa, joka helpottaa ihmisen paksusuolen adenokarsinooman syvempää ymmärtämistä, syöpäsolujen erilaistumisen molekyyliperustaa ja tehokkaiden syöpähoitojen kehittämistä.

Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • HT 29
  • HT29

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä. Muodostaa hyvin erilaistunutta adenokarsinoomaa, joka vastaa paksusuolen primaaria (aste I), kasvaimia muodostuu myös steroidihoidetuissa hamstereissa
Karyotyyppi
Kromosomiluku on hypertriploidi, ja 2S-komponenttia on 2,4 prosenttia. Useimmissa metafaaseissa on seitsemäntoista merkkikromosomia, yleensä yksi kopio kromosomia kohti. Markkerien nimet ovat: M1p-(=t(3p-,?), jossa on poistettu lyhyt varsi), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ ja xq-. Kromosomi 13 on nollisominen ja kromosomit 8 ja 14 ovat yleensä monosomisia. Y-kromosomia ei havaittu QM-kaista-analyysissä.
Kaksinkertaistumisaika
24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HT-29 (Cytionin luettelonumero 300215)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Urokinaasireseptori (u-PAR), D-vitamiini (kohtalainen ilmentyminen), ei havaittavaa plasminogeenin aktivaattoriaktiivisuutta.
Proteiinin ilmentyminen
CEA negatiivinen, p53 positiivinen
Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, galaktoosseramidin (mahdollinen vaihtoehtoinen reseptori HIV:lle) solupinnan ekspressio
Isoentsyymit
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0230
Onkogeenit
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Viruksille altistuminen
Ihmisen immuunikatovirus (HIV, LAV)
Tuotteet
IgA:n erittyvä komponentti, karsinoembryoninen antigeeni (CEA), transformoiva kasvutekijä beeta-sitova proteiini, mukiini, p53-antigeeni tuotetaan liikaa

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Hitaasti, solut tarvitsevat noin 48 tuntia asettuakseen ja kiinnittyäkseen.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
44 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen