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Células HT-29
Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
HT 29, HT29

Documentos

Células HT-29

Cell line · Número de producto 300215

La línea celular HT-29, derivada de un adenocarcinoma colorrectal humano de grado II, constituye un modelo de investigación fundamental en el estudio de los cánceres de colon humanos...

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01Información general

Descripción

La línea celular HT-29, derivada de un adenocarcinoma colorrectal humano de grado II, representa un modelo de investigación fundamental en el estudio de los cánceres de colon humanos. Derivadas de un tumor primario de una mujer de 44 años en 1964, las células HT22 han sido fundamentales para avanzar en nuestra comprensión de los mecanismos de adhesión o invasión de las células cancerosas. Como línea celular de adenocarcinoma humano, las células HT-29 presentan características muy similares a las de las células intestinales maduras, como los enterocitos, lo que subraya su utilidad para explorar la dinámica de la digestión de los alimentos y la biodisponibilidad de nutrientes.

Las células HT-29 son sensibles a las quimioterapias convencionales contra el cáncer colorrectal, incluidos el 5-fluorouracilo y el oxaliplatino. Esta sensibilidad, unida a su capacidad para expresar vías de diferenciación en condiciones específicas, como la privación de glucosa o el tratamiento con inductores como el butirato, las convierte en un modelo inestimable para investigar los mecanismos moleculares subyacentes a la diferenciación celular y la progresión del cáncer.

Además, las células HT-29 se han utilizado como modelo tumoral de xenoinjerto, proporcionando una plataforma para estudios in vivo que imitan el comportamiento del tumor en el cuerpo humano. Esta aplicación permite explorar el crecimiento tumoral, la metástasis y la eficacia de los agentes terapéuticos en situaciones in vivo.

En resumen, la línea celular HT-29 es una herramienta fundamental en la investigación médica y biológica, que facilita un conocimiento más profundo del adenocarcinoma de colon humano, las bases moleculares de la diferenciación de las células cancerosas y el desarrollo de tratamientos eficaces contra el cáncer.

Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • HT 29
  • HT29

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos. Forma adenocarcinoma bien diferenciado consistente con primario colónico (grado I), también se forman tumores en hámsters tratados con esteroides
Cariotipo
El número de cromosomas de la línea madre es hipertriploide, con un componente 2S del 2,4%. En la mayoría de las metafases se encuentran diecisiete cromosomas marcadores, generalmente en una sola copia por cromosoma. Las designaciones de los marcadores son: M1p-(=t(3p-,?) con un brazo corto suprimido), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, y xq-. El cromosoma 13 es nulisómico y los cromosomas 8 y 14 son generalmente monosómicos. No se detectó ningún cromosoma Y mediante el análisis de bandas QM.
Tiempo de duplicación
24 horas

04Identificadores

Referencia
HT-29 (número de catálogo 300215 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Receptor de la uroquinasa (u-PAR), vitamina D (expresión moderada), sin actividad detectable del activador del plasminógeno.
Expresión de proteínas
CEA negativo, p53 positivo
Expresión de antígenos
Tipo de sangre A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, expresión en la superficie celular de galactosa ceramida (un posible receptor alternativo para el VIH)
Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Producto de frecuencia de fenotipo: 0.0230
Oncogenes
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Susceptibilidad a los virus
Virus de la inmunodeficiencia humana (VIH, LAV)
Productos
Componente secretor de IgA, antígeno carcinoembrionario (CEA), proteína de unión al factor de crecimiento transformante beta, mucina, El antígeno p53 se produce en exceso

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Lentas, las células necesitan unas 48 horas para asentarse y adherirse.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
44 años
Origen étnico
Caucásico