Премини към съдържанието
Клетки HT-29
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
HT 29, HT29

Документи

Клетки HT-29

Cell line · Номер на продукта 300215

Клетъчната линия HT-29, получена от човешки колоректален аденокарцином II степен, представлява основен изследователски модел в проучването на раковите заболявания на дебелото черво при човека....

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HT-29, получена от аденокарцином на дебелото черво от II степен, представлява основен изследователски модел при изучаването на рака на дебелото черво при човека. Произведени от първичен тумор на 44-годишна жена през 1964 г., клетките HT22 са допринесли за напредъка в разбирането на механизмите на адхезия или инвазия на раковите клетки. Като клетъчна линия на човешки аденокарцином, клетките HT-29 притежават характеристики, които силно наподобяват тези на зрелите чревни клетки, като ентероцитите, което подчертава тяхната полезност при изследването на динамиката на храносмилането на храната и бионаличността на хранителните вещества.

Клетките HT-29 са чувствителни към конвенционалните химиотерапии за колоректален рак, включително 5-флуороурацил и оксалиплатин. Тази чувствителност, съчетана със способността им да експресират пътища на диференциация при специфични условия, като например лишаване от глюкоза или третиране с индуктори като бутират, ги превръща в безценен модел за изследване на молекулярните механизми, лежащи в основата на клетъчната диференциация и прогресията на рака.

Освен това клетките HT-29 се използват като ксенографт модел на тумор, осигурявайки платформа за in vivo изследвания, които имитират поведението на тумора в човешкото тяло. Това приложение дава възможност за изследване на туморния растеж, метастазите и ефикасността на терапевтичните средства в ситуации in vivo.

В обобщение, клетъчната линия HT-29 е ключов инструмент в медицинските и биологичните изследвания, който улеснява по-дълбокото разбиране на човешкия аденокарцином на дебелото черво, молекулярната основа на диференциацията на раковите клетки и разработването на ефективни методи за лечение на рак.

Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
  • HT 29
  • HT29

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки. Образува добре диференциран аденокарцином, съответстващ на първичен колониален (степен I), тумори се образуват и при третирани със стероиди хамстери
Кариотип
Хромозомният брой на стволовите хромозоми е хипертриплоиден, като компонентът 2S се среща в 2,4%. Седемнадесет маркерни хромозоми се откриват в повечето метафази, обикновено в по едно копие на хромозома. Обозначенията на маркерите са: M1p-(=t(3p-,?) с изтрито късо рамо), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ и xq-. Хромозома 13 е нулизомична, а хромозоми 8 и 14 са обикновено монозомични. Чрез QM лентов анализ не е открита Y хромозома.
Време за удвояване
24 часа

04Идентификатори

Източник
HT-29 (каталожен номер 300215 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0320

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Рецептор за урокиназа (u-PAR), витамин D (умерена експресия), не се открива активност на активатора на плазминогена.
Експресия на протеини
CEA отрицателен, p53 положителен
Експресия на антигена
Кръвна група А, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, експресия на галактоза церамид на клетъчната повърхност (възможен алтернативен рецептор за HIV)
Изоензими
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Фенотип Честота на продукта: 0.0230
Онкогени
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Податливост към вируси
Човешки имунодефицитен вирус (HIV, LAV)
Продукти
Секретен компонент на IgA, карциноембрионален антиген (CEA), протеин, свързващ трансформиращия растежен фактор бета, муцин, свръхпроизводство на антиген p53

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
Бавно, клетките се нуждаят от около 48 часа, за да се установят и прилепят.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
44 години
Етническа принадлежност
Кавказки