HT-29-Zellen
Cell line · Artikelnummer 300215
Die Zelllinie HT-29, die aus einem humanen kolorektalen Adenokarzinom des Grades II gewonnen wurde, stellt ein grundlegendes Forschungsmodell für die Erforschung von Darmkrebs beim Menschen dar....
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Die HT-29-Zelllinie, die von einem menschlichen kolorektalen Adenokarzinom des Grades II abstammt, ist ein wichtiges Forschungsmodell für die Untersuchung menschlicher Kolonkarzinome. Die HT22-Zellen, die 1964 aus dem Primärtumor einer 44-jährigen Frau gewonnen wurden, haben entscheidend dazu beigetragen, unser Verständnis der Adhäsions- und Invasionsmechanismen von Krebszellen zu verbessern. Als menschliche Adenokarzinom-Zelllinie weisen HT-29-Zellen Eigenschaften auf, die denen von reifen Darmzellen, wie z. B. Enterozyten, sehr ähnlich sind, was ihre Nützlichkeit bei der Erforschung der Dynamik der Nahrungsverdauung und der Bioverfügbarkeit von Nährstoffen unterstreicht.
HT-29-Zellen reagieren empfindlich auf herkömmliche Darmkrebs-Chemotherapien, darunter 5-Fluorouracil und Oxaliplatin. Diese Empfindlichkeit in Verbindung mit ihrer Fähigkeit, unter bestimmten Bedingungen wie Glukoseentzug oder Behandlung mit Induktoren wie Butyrat Differenzierungswege zu exprimieren, macht sie zu einem unschätzbaren Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die der Zelldifferenzierung und dem Fortschreiten von Krebs zugrunde liegen.
Darüber hinaus wurden HT-29-Zellen als Xenotransplantat-Tumormodell verwendet, das eine Plattform für In-vivo-Studien bietet, die das Verhalten des Tumors im menschlichen Körper imitieren. Diese Anwendung ermöglicht die Erforschung des Tumorwachstums, der Metastasierung und der Wirksamkeit therapeutischer Wirkstoffe in in vivo-Situationen.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die HT-29-Zelllinie ein zentrales Instrument in der medizinischen und biologischen Forschung ist, das ein tieferes Verständnis des menschlichen Kolon-Adenokarzinoms, der molekularen Grundlagen der Krebszelldifferenzierung und der Entwicklung wirksamer Krebsbehandlungen ermöglicht.
- Gewebe
- Doppelpunkt
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Synonyme
- HT 29
- HT29
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Tumorauslösend
- Ja, in Nacktmäusen. Bildet gut differenzierte Adenokarzinome, die mit einem primären Kolonkarzinom (Grad I) übereinstimmen; Tumore bilden sich auch in steroidbehandelten Hamstern
- Karyotyp
- Die Stammchromosomenzahl ist hypertriploid, wobei die 2S-Komponente zu 2,4 % vorkommt. Siebzehn Markerchromosomen finden sich in den meisten Metaphasen, im Allgemeinen in einfacher Kopie pro Chromosom. Die Markerbezeichnungen sind: M1p-(=t(3p-,?) mit einem deletierten kurzen Arm), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, und xq-. Chromosom 13 ist nullisomisch und die Chromosomen 8 und 14 sind im Allgemeinen monosomisch. Bei der QM-Bandenanalyse wurde kein Y-Chromosom nachgewiesen.
- Verdopplungszeit
- 24 Stunden
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HT-29 (Cytion Katalognummer 300215)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0320
05Expression und Anfälligkeit
- Exprimierte Rezeptoren
- Urokinase-Rezeptor (u-PAR), Vitamin D (mäßige Expression), keine nachweisbare Plasminogenaktivator-Aktivität.
- Proteinexpression
- CEA negativ, p53 positiv
- Antigenexpression
- Blutgruppe A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, Zelloberflächenexpression von Galaktose-Ceramid (ein möglicher alternativer Rezeptor für HIV)
- Isoenzyme
- Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0230
- Onkogene
- Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
- Anfälligkeit für Viren
- Humanes Immundefizienz-Virus (HIV, LAV)
- Produkte
- Sekretorische Komponente von IgA, karzinoembryonales Antigen (CEA), Transforming Growth Factor Beta-Bindungsprotein, Mucin, Das p53-Antigen wird überproduziert
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Aussaatdichte
- 3 x 104 Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Erholung nach dem Auftauen
- Langsam, die Zellen brauchen etwa 48 Stunden, um sich anzusiedeln und anzuhaften.
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 44 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja

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