Zum Inhalt springen
HT-29-Zellen
Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
HT 29, HT29

Dokumente

HT-29-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300215

Die Zelllinie HT-29, die aus einem humanen kolorektalen Adenokarzinom des Grades II gewonnen wurde, stellt ein grundlegendes Forschungsmodell für die Erforschung von Darmkrebs beim Menschen dar....

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HT-29-Zelllinie, die von einem menschlichen kolorektalen Adenokarzinom des Grades II abstammt, ist ein wichtiges Forschungsmodell für die Untersuchung menschlicher Kolonkarzinome. Die HT22-Zellen, die 1964 aus dem Primärtumor einer 44-jährigen Frau gewonnen wurden, haben entscheidend dazu beigetragen, unser Verständnis der Adhäsions- und Invasionsmechanismen von Krebszellen zu verbessern. Als menschliche Adenokarzinom-Zelllinie weisen HT-29-Zellen Eigenschaften auf, die denen von reifen Darmzellen, wie z. B. Enterozyten, sehr ähnlich sind, was ihre Nützlichkeit bei der Erforschung der Dynamik der Nahrungsverdauung und der Bioverfügbarkeit von Nährstoffen unterstreicht.

HT-29-Zellen reagieren empfindlich auf herkömmliche Darmkrebs-Chemotherapien, darunter 5-Fluorouracil und Oxaliplatin. Diese Empfindlichkeit in Verbindung mit ihrer Fähigkeit, unter bestimmten Bedingungen wie Glukoseentzug oder Behandlung mit Induktoren wie Butyrat Differenzierungswege zu exprimieren, macht sie zu einem unschätzbaren Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die der Zelldifferenzierung und dem Fortschreiten von Krebs zugrunde liegen.

Darüber hinaus wurden HT-29-Zellen als Xenotransplantat-Tumormodell verwendet, das eine Plattform für In-vivo-Studien bietet, die das Verhalten des Tumors im menschlichen Körper imitieren. Diese Anwendung ermöglicht die Erforschung des Tumorwachstums, der Metastasierung und der Wirksamkeit therapeutischer Wirkstoffe in in vivo-Situationen.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die HT-29-Zelllinie ein zentrales Instrument in der medizinischen und biologischen Forschung ist, das ein tieferes Verständnis des menschlichen Kolon-Adenokarzinoms, der molekularen Grundlagen der Krebszelldifferenzierung und der Entwicklung wirksamer Krebsbehandlungen ermöglicht.

Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • HT 29
  • HT29

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet gut differenzierte Adenokarzinome, die mit einem primären Kolonkarzinom (Grad I) übereinstimmen; Tumore bilden sich auch in steroidbehandelten Hamstern
Karyotyp
Die Stammchromosomenzahl ist hypertriploid, wobei die 2S-Komponente zu 2,4 % vorkommt. Siebzehn Markerchromosomen finden sich in den meisten Metaphasen, im Allgemeinen in einfacher Kopie pro Chromosom. Die Markerbezeichnungen sind: M1p-(=t(3p-,?) mit einem deletierten kurzen Arm), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, und xq-. Chromosom 13 ist nullisomisch und die Chromosomen 8 und 14 sind im Allgemeinen monosomisch. Bei der QM-Bandenanalyse wurde kein Y-Chromosom nachgewiesen.
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
HT-29 (Cytion Katalognummer 300215)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Urokinase-Rezeptor (u-PAR), Vitamin D (mäßige Expression), keine nachweisbare Plasminogenaktivator-Aktivität.
Proteinexpression
CEA negativ, p53 positiv
Antigenexpression
Blutgruppe A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, Zelloberflächenexpression von Galaktose-Ceramid (ein möglicher alternativer Rezeptor für HIV)
Isoenzyme
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0230
Onkogene
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Anfälligkeit für Viren
Humanes Immundefizienz-Virus (HIV, LAV)
Produkte
Sekretorische Komponente von IgA, karzinoembryonales Antigen (CEA), Transforming Growth Factor Beta-Bindungsprotein, Mucin, Das p53-Antigen wird überproduziert

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Langsam, die Zellen brauchen etwa 48 Stunden, um sich anzusiedeln und anzuhaften.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
44 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch