Langsung ke isi
Sel HT-29
Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
HT 29, HT29

Sel HT-29

Cell line · Nomor produk 300215

Baris sel HT-29, yang berasal dari adenokarsinoma kolorektal manusia derajat II, merupakan model penelitian yang sangat penting dalam studi tentang kanker usus besar manusia....

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel HT-29, yang berasal dari adenokarsinoma kolorektal manusia tingkat II, merupakan model penelitian utama dalam studi kanker usus besar manusia. Berasal dari tumor primer pada wanita berusia 44 tahun pada tahun 1964, sel HT22 telah berperan penting dalam memajukan pemahaman kita tentang mekanisme adhesi atau invasi sel kanker. Sebagai garis sel adenokarsinoma manusia, sel HT-29 menunjukkan karakteristik yang sangat mirip dengan sel usus dewasa, seperti enterosit, menggarisbawahi kegunaannya dalam mengeksplorasi dinamika pencernaan makanan dan ketersediaan hayati nutrisi.

Sel HT-29 sensitif terhadap kemoterapi kanker kolorektal konvensional, termasuk 5-fluorourasil dan oxaliplatin. Sensitivitas ini, ditambah dengan kemampuannya untuk mengekspresikan jalur diferensiasi dalam kondisi tertentu, seperti kekurangan glukosa atau pengobatan dengan penginduksi seperti butirat, menjadikannya model yang sangat berharga untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendasari diferensiasi sel dan perkembangan kanker.

Selain itu, sel HT-29 telah digunakan sebagai model tumor xenograft, menyediakan platform untuk penelitian in vivo yang meniru perilaku tumor dalam tubuh manusia. Aplikasi ini memungkinkan eksplorasi pertumbuhan tumor, metastasis, dan kemanjuran agen terapeutik dalam situasi in vivo.

Singkatnya, garis sel HT-29 adalah alat yang sangat penting dalam penelitian medis dan biologi, memfasilitasi pemahaman yang lebih dalam tentang adenokarsinoma usus besar manusia, dasar molekuler diferensiasi sel kanker, dan pengembangan pengobatan kanker yang efektif.

Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
  • HT 29
  • HT29

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang. Bentuk adenokarsinoma yang terdiferensiasi dengan baik yang konsisten dengan kolon primer (grade I), tumor juga terbentuk pada hamster yang diberi steroid
Kariotipe
Jumlah kromosom batang adalah hipertriploid dengan komponen 2S yang muncul sebesar 2,4%. Tujuh belas kromosom penanda ditemukan pada sebagian besar metafase, umumnya dalam satu salinan per kromosom. Penunjukan penanda tersebut adalah: M1p- (=t(3p-,?) dengan lengan pendek yang dihapus), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, dan xq-. Kromosom 13 adalah nullisomik dan kromosom 8 dan 14 umumnya monosomik. Tidak ada kromosom Y yang terdeteksi oleh analisis pita QM.
Waktu penggandaan
24 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HT-29 (Nomor katalog Cytion 300215)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
Reseptor Urokinase (u-PAR), vitamin D (ekspresi sedang), tidak ada aktivitas aktivator plasminogen yang terdeteksi.
Ekspresi protein
CEA negatif, p53 positif
Ekspresi antigen
Golongan Darah A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, ekspresi permukaan sel dari galaktosa ceramide (kemungkinan reseptor alternatif untuk HIV)
Isoenzim
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Produk Frekuensi Fenotipe: 0.0230
Onkogen
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Kerentanan terhadap virus
Virus imunodefisiensi manusia (HIV, LAV)
Produk
Komponen sekresi IgA, carcinoembryonic antigen (CEA), protein pengikat beta faktor pertumbuhan yang mengubah, mucin, Antigen p53 diproduksi secara berlebihan

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
3 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Lambat, sel membutuhkan waktu sekitar 48 jam untuk mengendap dan melekat.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
44 tahun
Etnis
Kaukasia