Gå direkt till innehållet
HT-29-celler
Vävnad
Kolon
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
HT 29, HT29

HT-29-celler

Cell line · Produktnummer 300215

Cellinjen HT-29, som härrör från ett humant adenokarcinom i tjocktarmen av grad II, utgör en grundläggande forskningsmodell för studier av koloncancer hos människor....

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen HT-29, som härrör från ett kolorektalt adenokarcinom av grad II hos människa, är en hörnstensmodell i forskningen om koloncancer hos människa. HT22-cellerna, som härstammar från en primärtumör hos en 44-årig kvinna 1964, har bidragit till att öka vår förståelse för cancercellers adhesions- och invasionsmekanismer. HT-29-cellerna, som är en human adenocarcinomcellinje, uppvisar egenskaper som nära efterliknar mogna tarmceller, t.ex. enterocyter, vilket understryker deras användbarhet för att utforska dynamiken i matsmältningen och näringsämnenas biotillgänglighet.

HT-29-celler är känsliga för konventionella kemoterapier mot kolorektal cancer, inklusive 5-fluorouracil och oxaliplatin. Denna känslighet, i kombination med deras förmåga att uttrycka differentieringsvägar under specifika förhållanden, t.ex. glukosbrist eller behandling med inducerare som butyrat, gör dem till en ovärderlig modell för att undersöka de molekylära mekanismer som ligger bakom celldifferentiering och cancerutveckling.

HT-29-celler har dessutom använts som en xenograftmodell för tumörer, vilket ger en plattform för in vivo-studier som efterliknar tumörens beteende i människokroppen. Denna tillämpning gör det möjligt att utforska tumörtillväxt, metastasering och effekten av terapeutiska medel i in vivo-situationer.

Sammanfattningsvis är HT-29-cellinjen ett centralt verktyg inom medicinsk och biologisk forskning, vilket underlättar en djupare förståelse av adenokarcinom i tjocktarmen hos människa, den molekylära grunden för cancercellers differentiering och utvecklingen av effektiva cancerbehandlingar.

Vävnad
Kolon
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
  • HT 29
  • HT29

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss. Bildar väldifferentierat adenokarcinom som överensstämmer med primärt kolon (grad I), tumörer bildas även i steroidbehandlade hamstrar
Karyotyp
Stamkromosomantalet är hypertriploid och 2S-komponenten förekommer med 2,4%. Sjutton markörkromosomer finns i de flesta metafaser, i allmänhet i en enda kopia per kromosom. Markörbeteckningarna är: M1p-(=t(3p-,?) med en borttagen kort arm), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ och xq-. Kromosom 13 är nullisomisk och kromosomerna 8 och 14 är i allmänhet monosomiska. Ingen Y-kromosom kunde påvisas med QM-bandanalys.
Fördubblingstid
24 timmar

04Identifierare

Källa
HT-29 (Cytion katalognummer 300215)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Urokinasreceptor (u-PAR), vitamin D (måttligt uttryck), ingen påvisbar plasminogenaktivatoraktivitet.
Proteinexpression
CEA-negativ, p53-positiv
Antigenuttryck
Blodgrupp A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, uttryck på cellytan av galaktosceramid (en möjlig alternativ receptor för HIV)
Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyp Frekvens Produkt: 0.0230
Onkogener
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Virusmottaglighet
Humant immunbristvirus (HIV, LAV)
Produkter
Sekretorisk komponent av IgA, carcinoembryonalt antigen (CEA), transforming growth factor beta binding protein, mucin, p53-antigenet överproduceras

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
3 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Cellerna är långsamma och behöver cirka 48 timmar för att sätta sig och fästa.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
44 år
Etnicitet
Kaukasisk