Skip to content
תאי HT-29
Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
HT 29, HT29

Documents

תאי HT-29

Cell line · Product number 300215

The HT-29 cell line, derived from a Grade II human colorectal adenocarcinoma, represents a cornerstone research model in the study of human colon cancers....

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים HT-29, שמקורו באדנוקרצינומה של המעי הגס בדרגה II בבני אדם, מהווה מודל מחקר בסיסי בחקר סרטן המעי הגס בבני אדם. תאי HT22, שמקורם בגידול ראשוני באישה בת 44 בשנת 1964, היו מכריעים בקידום ההבנה שלנו לגבי מנגנוני ההדבקה או הפלישה של תאי סרטן. כתאי אדנוקרצינומה אנושיים, תאי HT-29 מציגים מאפיינים הדומים מאוד לאלה של תאי מעי בוגרים, כגון אנטרוציטים, מה שמדגיש את השימושיות שלהם בחקר הדינמיקה של עיכול המזון וזמינותם הביולוגית של חומרים מזינים.

תאי HT-29 רגישים לטיפולים כימותרפיים קונבנציונליים בסרטן המעי הגס, כולל 5-fluorouracil ו-oxaliplatin. רגישות זו, בשילוב עם יכולתם לבטא מסלולי התמיינות בתנאים ספציפיים, כגון מחסור בגלוקוז או טיפול במעוררים כגון בוטיראט, הופכת אותם למודל יקר ערך לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התמיינות התאים והתקדמות הסרטן.

יתר על כן, תאי HT-29 שימשו כמודל לגידולים בהשתלות זרות, ומספקים פלטפורמה למחקרים in vivo המדמים את התנהגות הגידול בגוף האדם. יישום זה מאפשר לחקור את צמיחת הגידול, את הגרורות ואת היעילות של חומרים טיפוליים במצבים in vivo.

לסיכום, קו התאים HT-29 הוא כלי מרכזי במחקר רפואי וביולוגי, המאפשר הבנה מעמיקה יותר של אדנוקרצינומה של המעי הגס האנושי, הבסיס המולקולרי של התמיינות תאי סרטן ופיתוח טיפולים יעילים בסרטן.

Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • HT 29
  • HT29

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים. נוצרים אדנוקרצינומות מובחנות היטב התואמות את הממאירות הראשונית במעי הגס (דרגה I), גידולים נוצרים גם בחולדות שטופלו בסטרואידים
Karyotype
מספר הכרומוזומים בגזע הוא היפרטריפלואידי, עם רכיב 2S המופיע ב-2.4%. ברוב המטאפזות נמצאו 17 כרומוזומים סמנים, בדרך כלל בעותק אחד לכל כרומוזום. שמות הסמנים הם: M1p-(=t(3p-,?) עם זרוע קצרה שנמחקה), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ ו-xq-. כרומוזום 13 הוא נוליסומי וכרומוזומים 8 ו-14 הם בדרך כלל מונוזומיים. לא זוהה כרומוזום Y בניתוח רצועות QM.
Doubling time
24 שעות

04Identifiers

Citation
HT-29 (מספר קטלוגי Cytion 300215)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
קולטן אורוקינאז (u-PAR), ויטמין D (ביטוי מתון), ללא פעילות זיהוי של מפעיל פלסמינוגן.
Protein expression
CEA שלילי, p53 חיובי
Antigen expression
סוג דם A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, ביטוי על פני תאים של גלקטוז סרמיד (קולטן חלופי אפשרי ל-HIV)
Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0230
Oncogenes
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Virus susceptibility
נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV, LAV)
Products
מרכיב הפרשה של IgA, אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), חלבון קושר גורם גדילה טרנספורמטיבי בטא, מוקין, ייצור יתר של אנטיגן p53

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאט, התאים זקוקים לכ-48 שעות כדי להתייצב ולהידבק.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
44 שנים
Ethnicity
קווקזי