Preskoči na vsebino
Celice HT-29
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
HT 29, HT29

Dokumenti

Celice HT-29

Cell line · Številka izdelka 300215

Celična linija HT-29, pridobljena iz človeškega kolorektalnega adenokarcinoma stopnje II, predstavlja temeljni raziskovalni model pri preučevanju raka debelega črevesa pri človeku....

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HT-29, pridobljena iz človeškega adenokarcinoma debelega črevesa II. stopnje, je temeljni raziskovalni model pri preučevanju človeškega raka debelega črevesa. Celice HT22, pridobljene iz primarnega tumorja pri 44-letni ženski leta 1964, so bile ključnega pomena za boljše razumevanje mehanizmov adhezije ali invazije rakavih celic. Kot celična linija človeškega adenokarcinoma imajo celice HT-29 značilnosti, ki natančno posnemajo značilnosti zrelih črevesnih celic, kot so enterociti, kar poudarja njihovo uporabnost pri raziskovanju dinamike prebave hrane in biološke dostopnosti hranil.

Celice HT-29 so občutljive na običajne kemoterapije kolorektalnega raka, vključno s 5-fluorouracilom in oksaliplatinom. Zaradi te občutljivosti in sposobnosti izražanja diferenciacijskih poti pod posebnimi pogoji, kot je pomanjkanje glukoze ali zdravljenje z induktorji, kot je butirat, so neprecenljiv model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za diferenciacijo celic in napredovanje raka.

Poleg tega so bile celice HT-29 uporabljene kot ksenografski model tumorja, kar zagotavlja platformo za študije in vivo, ki posnemajo obnašanje tumorja v človeškem telesu. Ta uporaba omogoča raziskovanje rasti tumorjev, metastaziranja in učinkovitosti terapevtskih sredstev v razmerah in vivo.

Če povzamemo, je celična linija HT-29 ključno orodje v medicinskih in bioloških raziskavah, ki omogoča boljše razumevanje adenokarcinoma debelega črevesa, molekularne osnove diferenciacije rakavih celic in razvoj učinkovitih načinov zdravljenja raka.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • HT 29
  • HT29

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših. Oblikuje dobro diferenciran adenokarcinom, ki ustreza primarnemu kolonu (stopnja I), tumorji se pojavijo tudi pri hrčkih, zdravljenih s steroidi
Kariotip
Število matičnih kromosomov je hipertriploidno, komponenta 2S je prisotna v 2,4 %. V večini metafaz je sedemnajst označevalnih kromosomov, običajno v eni kopiji na kromosom. Označbe označevalcev so: M1p-(=t(3p-,?) z izbrisano kratko roko), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ in xq-. Kromosom 13 je nullisomičen, kromosoma 8 in 14 pa sta običajno monosomična. S pasovno analizo QM ni bilo mogoče odkriti kromosoma Y.
Čas podvojitve
24 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HT-29 (kataloška številka Cytion 300215)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Receptor za urokinazo (u-PAR), vitamin D (zmerno izražanje), aktivnost aktivatorja plazminogena ni zaznavna.
Ekspresija beljakovin
CEA negativen, p53 pozitiven
Ekspresija antigena
Krvna skupina A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, izražanje galaktoze ceramida na površini celic (možen alternativni receptor za HIV)
Izoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0230
Onkogeni
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Občutljivost na virus
Virus človeške imunske pomanjkljivosti (HIV, LAV)
Izdelki
Sekretorna komponenta IgA, karcinoembrionalni antigen (CEA), beljakovina, ki veže transformirajoči rastni faktor beta, mucin, antigen p53 se prekomerno proizvaja

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Počasi potrebujejo celice približno 48 ur, da se ustalijo in zlepijo.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
44 let
Etnična pripadnost
Kavkaški