HT-29 細胞
Cell line · Product number 300215
The HT-29 cell line, derived from a Grade II human colorectal adenocarcinoma, represents a cornerstone research model in the study of human colon cancers....
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01General information
- Description
HT-29 細胞系源自一例 II 級人類結直腸腺癌，是研究人類結腸癌的重要基礎研究模型。 HT-29 細胞源於 1964 年一名 44 歲女性的原發性腫瘤，在促進我們對癌細胞黏附或侵襲機制之理解方面發揮了關鍵作用。 作為一種人類腺癌細胞系，HT-29 細胞展現出與成熟腸細胞（如腸上皮細胞）極為相似的特徵，這凸顯了其在探索食物消化動態與營養素生物利用度方面的實用價值。
HT-29 細胞對傳統的大腸直腸癌化療藥物（包括 5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑）敏感。 這種敏感性，加上其在特定條件下（例如葡萄糖匱乏或使用丁酸等誘導劑處理）能表現分化路徑的能力，使其成為研究細胞分化與癌症進展背後分子機制的一種無價模型。
此外，HT-29 細胞已被用作異種移植腫瘤模型，為模擬腫瘤在人體內行為的體內研究提供了平台。此應用可讓研究人員在體內環境中探索腫瘤的生長、轉移，以及治療藥物的療效。
總而言之，HT-29 細胞系是醫學與生物學研究中的關鍵工具，有助於更深入地理解人類結腸腺癌、癌細胞分化的分子基礎，以及開發有效的癌症治療方法。
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- HT 29
- HT29
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上。會形成分化良好的腺癌，與結腸原發性腫瘤（I級）相符；在接受類固醇治療的倉鼠身上也會形成腫瘤。
- Karyotype
- 該系統的染色體數目為超三倍體，其中 2S 成分佔 2.4%。在大多數中期階段均可發現十七條標記染色體，通常每條染色體僅有一份拷貝。 標記染色體的命名如下：M1p-（=t(3p-,?)，其短臂缺失）、t(7q,?)、t(10q,?)、i(13q)、19q+a。 M6、?t(8q,9q-)、?xp、M9、6q+、t(13,?)a、t(13,?)b、19q+b、M14、M15、15p+ 及 xq-。 第13號染色體呈零異體，第8號與第14號染色體則通常呈單體。經QM帶分析，未檢測到Y染色體。
- Doubling time
- 24小時
04Identifiers
- Citation
- HT-29（Cytion 型號 300215）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0320
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- 尿激酶受體（u-PAR）、維生素 D（中等表達），未檢測到纖溶酶原活化劑活性。
- Protein expression
- CEA 陰性，p53 陽性
- Antigen expression
- A型血，Rh+，HLA A1、A3、B12、B17、Cw5，CD4-，細胞表面表達半乳糖神經醯胺（可能是HIV的另一種受體）
- Isoenzymes
- Me-2，1；PGM3，1-2；PGM1，1-2；ES-D，1；AK-1，1；GLO-1，1-2；G6PD，B；表型頻率積：0.0230
- Oncogenes
- Myc+、ras+、myb+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src-
- Virus susceptibility
- 人類免疫缺陷病毒（HIV，LAV）
- Products
- IgA 的分泌成分、癌胚抗原（CEA）、轉化生長因子β結合蛋白、黏蛋白，以及 p53 抗原的過度產生
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 請稍等，細胞大約需要 48 小時才能沉澱並附著。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 44年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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