İçeriğe atla
HT-29 Hücreleri
Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
HT 29, HT29

HT-29 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300215

II. derece bir insan kolorektal adenokarsinomundan elde edilen HT-29 hücre hattı, insan kolon kanserlerinin araştırılmasında temel bir araştırma modelini temsil etmektedir....

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Sınıf II insan kolorektal adenokarsinomundan türetilen HT-29 hücre hattı, insan kolon kanserlerinin incelenmesinde bir köşe taşı araştırma modelini temsil etmektedir. 1964'te 44 yaşında bir kadındaki primer tümörden türetilen HT22 hücreleri, kanser hücrelerinin adezyon veya invazyon mekanizmalarına ilişkin anlayışımızı geliştirmede etkili olmuştur. Bir insan adenokarsinom hücre hattı olarak HT-29 hücreleri, enterositler gibi olgun bağırsak hücrelerini yakından taklit eden özellikler sergileyerek, gıda sindirimi ve besin biyoyararlanımının dinamiklerini keşfetmedeki faydalarının altını çizmektedir.

HT-29 hücreleri, 5-florourasil ve oksaliplatin dahil olmak üzere geleneksel kolorektal kanser kemoterapilerine duyarlıdır. Bu hassasiyet, glikoz yoksunluğu veya bütirat gibi indükleyicilerle tedavi gibi belirli koşullar altında farklılaşma yollarını ifade etme yetenekleriyle birleştiğinde, onları hücre farklılaşması ve kanser ilerlemesinin altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için paha biçilmez bir model haline getirir.

Ayrıca, HT-29 hücreleri bir ksenograft tümör modeli olarak kullanılmış ve tümörün insan vücudundaki davranışını taklit eden in vivo çalışmalar için bir platform sağlamıştır. Bu uygulama, in vivo durumlarda tümör büyümesi, metastaz ve terapötik ajanların etkinliğinin araştırılmasına olanak tanır.

Özetle, HT-29 hücre hattı tıbbi ve biyolojik araştırmalarda çok önemli bir araçtır ve insan kolon adenokarsinomunun daha iyi anlaşılmasını, kanser hücresi farklılaşmasının moleküler temelini ve etkili kanser tedavilerinin geliştirilmesini kolaylaştırır.

Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • HT 29
  • HT29

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. Kolonik primer (derece I) ile uyumlu iyi diferansiye adenokarsinom oluşturur, steroid ile tedavi edilen hamsterlarda da tümörler oluşur
Karyotip
Kök kromozom sayısı hipertriploiddir ve 2S bileşeni %2,4 oranında görülür. On yedi işaret kromozomu çoğu metafazda, genellikle kromozom başına tek kopya halinde bulunur. İşaretleyici tanımlamaları şunlardır: M1p-(=t(3p-,?) silinmiş bir kısa kol ile), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ ve xq-. Kromozom 13 nullisomiktir ve kromozom 8 ve 14 genellikle monosomiktir. QM bant analizi ile Y kromozomu tespit edilmemiştir.
İki katına çıkma süresi
24 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HT-29 (Cytion katalog numarası 300215)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Ürokinaz reseptörü (u-PAR), D vitamini (orta düzeyde ekspresyon), saptanabilir plazminojen aktivatör aktivitesi yok.
Protein ekspresyonu
CEA negatif, p53 pozitif
Antijen ekspresyonu
Kan Grubu A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, galaktoz seramidin hücre yüzeyi ekspresyonu (HIV için olası bir alternatif reseptör)
İzoenzimler
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotip Frekans Ürünü: 0.0230
Onkogenler
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Virüse karşı duyarlılık
İnsan immün yetmezlik virüsü (HIV, LAV)
Ürünler
IgA'nın salgı bileşeni, karsinoembriyonik antijen (CEA), dönüştürücü büyüme faktörü beta bağlayıcı protein, müsin, p53 antijeni aşırı üretilir

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Yavaş, hücrelerin yerleşmesi ve yapışması için yaklaşık 48 saat gerekir.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
44 yıl
Etnik köken
Kafkas