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HT-29 셀

Cell line · 제품 번호 300215

2등급 인간 대장 선암에서 유래한 HT-29 세포주는 인간 대장암 연구의 핵심 연구 모델로 자리 잡고 있다....

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01일반 정보

설명

HT-29 세포주는 2등급 인간 대장 선암에서 추출한 것으로, 인간 대장암 연구의 초석 연구 모델입니다. 1964년 44세 여성의 원발성 종양에서 유래한 HT22 세포는 암세포의 부착 또는 침습 메커니즘에 대한 이해를 발전시키는 데 중요한 역할을 해왔습니다. 인간 선암 세포주인 HT-29 세포는 장세포와 같은 성숙한 장 세포와 매우 유사한 특성을 보여 음식물 소화와 영양소 생체 이용률의 역학을 탐구하는 데 유용합니다.

HT-29 세포는 5-플루오로우라실과 옥살리플라틴을 포함한 기존의 대장암 화학요법에 민감합니다. 이러한 민감성은 포도당 결핍이나 부티레이트와 같은 유도제 처리와 같은 특정 조건에서 분화 경로를 발현하는 능력과 결합되어 세포 분화 및 암 진행의 기초가 되는 분자 메커니즘을 연구하는 데 귀중한 모델이 됩니다.

또한 HT-29 세포는 이종 이식 종양 모델로 활용되어 인체에서 종양의 행동을 모방하는 생체 내 연구를 위한 플랫폼을 제공합니다. 이를 통해 종양의 성장, 전이, 치료제의 효능을 생체 내 상황에서 탐구할 수 있습니다.

요약하자면, HT-29 세포주는 의학 및 생물학 연구의 중추적인 도구로서 인간 대장 선암종에 대한 심층적인 이해, 암세포 분화의 분자적 기초, 효과적인 암 치료법 개발을 촉진하는 데 도움이 됩니다.

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02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서. 대장 원발성(1등급)과 일치하는 잘 분화된 선암을 형성하며, 스테로이드 치료 햄스터에서도 종양이 형성됩니다
염색체형
줄기 염색체 수는 2S 성분이 2.4%로 나타나는 배수체입니다. 17개의 마커 염색체는 대부분의 메타상에서 발견되며, 일반적으로 염색체당 단일 사본으로 존재합니다. 마커 명칭은 다음과 같습니다: M1p-(=t(3p-,?)(짧은 암이 삭제된 경우), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, xq-. 염색체 13번은 이수염색체이고 염색체 8번과 14번은 일반적으로 단염색체입니다. QM 밴드 분석에서 Y 염색체는 검출되지 않았습니다.
배가 시간
24시간

04식별자

인용
HT-29(사이티온 카탈로그 번호 300215)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0320

05발현 및 감수성

발현된 수용체
우로키나아제 수용체(u-PAR), 비타민 D(보통 발현), 플라스미노겐 활성화제 활성 미검출.
단백질 발현
CEA 음성, p53 양성
항원 발현
혈액형 A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, 갈락토스 세라마이드의 세포 표면 발현(HIV의 대체 수용체 가능성)
이소효소
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, 표현형 주파수 제품: 0.0230
발암유전자
MYC+, RAS+, MYB+, FOS+, SIS+, P53+, ABL -, ROS -, SRC -
바이러스 감수성
인간 면역결핍 바이러스(HIV, LAV)
제품
IgA의 분비 성분, 암 배아 항원 (CEA), 형질 전환 성장 인자 베타 결합 단백질, 뮤신, p53 항원이 과잉 생산됩니다

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
3 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
느리게는 세포가 안정화되고 부착되는 데 약 48시간이 걸립니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
44년
민족
백인