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Cellules HT-29
Tissue
Deux-points
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
HT 29, HT29

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Cellules HT-29

Cell line · Product number 300215

The HT-29 cell line, derived from a Grade II human colorectal adenocarcinoma, represents a cornerstone research model in the study of human colon cancers....

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire HT-29, dérivée d’un adénocarcinome colorectal humain de grade II, constitue un modèle de recherche fondamental dans l’étude des cancers du côlon chez l’humain. Isolées à partir d’une tumeur primaire chez une femme de 44 ans en 1964, les cellules HT-29 ont joué un rôle déterminant dans l’avancement de notre compréhension des mécanismes d’adhésion et d’invasion des cellules cancéreuses. En tant que lignée cellulaire d’adénocarcinome humain, les cellules HT-29 présentent des caractéristiques qui imitent étroitement celles des cellules intestinales matures, telles que les entérocytes, ce qui souligne leur utilité dans l’étude de la dynamique de la digestion des aliments et de la biodisponibilité des nutriments.

Les cellules HT-29 sont sensibles aux chimiothérapies conventionnelles contre le cancer colorectal, notamment au 5-fluorouracile et à l’oxaliplatine. Cette sensibilité, combinée à leur capacité à activer des voies de différenciation dans des conditions spécifiques, telles que la privation de glucose ou le traitement par des inducteurs comme le butyrate, en fait un modèle inestimable pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents à la différenciation cellulaire et à la progression du cancer.

De plus, les cellules HT-29 ont été utilisées comme modèle de tumeur par xénogreffe, offrant ainsi une plateforme pour des études in vivo qui reproduisent le comportement de la tumeur dans le corps humain. Cette application permet d’étudier la croissance tumorale, les métastases et l’efficacité des agents thérapeutiques dans des conditions in vivo.

En résumé, la lignée cellulaire HT-29 constitue un outil essentiel dans la recherche médicale et biologique, facilitant une meilleure compréhension de l’adénocarcinome du côlon humain, des fondements moléculaires de la différenciation des cellules cancéreuses et du développement de traitements anticancéreux efficaces.

Tissue
Deux-points
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
  • HT 29
  • HT29

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues. On observe la formation d’un adénocarcinome bien différencié, compatible avec une tumeur primitive du côlon (grade I); des tumeurs se développent également chez les hamsters traités aux stéroïdes.
Karyotype
Le nombre de chromosomes de la lignée souche est hypertriploïde, la composante 2S représentant 2,4 %. Dix-sept chromosomes marqueurs sont observés dans la plupart des métaphases, généralement en un seul exemplaire par chromosome. Les désignations des marqueurs sont les suivantes : M1p-( (= t(3p-,?) avec une délétion du bras court), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ et xq-. Le chromosome 13 est nullisomique et les chromosomes 8 et 14 sont généralement monosomiques. Aucun chromosome Y n’a été détecté par analyse par bandes QM.
Doubling time
24 heures

04Identifiers

Citation
HT-29 (numéro de catalogue Cytion 300215)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Récepteur de l'urokinase (u-PAR), vitamine D (expression modérée), aucune activité détectable de l'activateur du plasminogène.
Protein expression
CEA négatif, p53 positif
Antigen expression
Groupe sanguin A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, expression à la surface cellulaire du galactose-céramide (un récepteur alternatif possible pour le VIH)
Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, produit de la fréquence phénotypique : 0,0230
Oncogenes
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Virus susceptibility
Virus de l'immunodéficience humaine (VIH, LAV)
Products
Composant sécrétoire de l'IgA, antigène carcino-embryonnaire (CEA), protéine de liaison au facteur de croissance transformant bêta, mucine; l'antigène p53 est surproduit

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
C'est un processus lent : les cellules ont besoin d'environ 48 heures pour se déposer et adhérer.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
44 ans
Ethnicity
caucasien