Tartalomra ugrás
HT-29 sejtek
Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
HT 29, HT29

Dokumentumok

HT-29 sejtek

Cell line · Termékszám 300215

A II. fokozatú humán kolorektális adenokarcinómából származó HT-29 sejtvonal az emberi vastagbélrákok kutatásának egyik alapvető kutatási modellje....

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HT-29 sejtvonal, amely egy II. fokú humán kolorektális adenokarcinómából származik, a humán vastagbélrák tanulmányozásának egyik sarokköve. Az 1964-ben egy 44 éves nő elsődleges daganatából származó HT-29 sejtek nagyban hozzájárultak a rákos sejtek adhéziós vagy inváziós mechanizmusainak megértéséhez. Humán adenokarcinóma sejtvonalként a HT-29 sejtek olyan tulajdonságokkal rendelkeznek, amelyek szorosan utánozzák az érett bélsejtek, például az enterociták tulajdonságait, ami aláhúzza hasznosságukat a táplálékemésztés és a tápanyagok biológiai hozzáférhetőségének dinamikájának feltárásában.

A HT-29 sejtek érzékenyek a hagyományos vastagbélrák kemoterápiákra, beleértve az 5-fluorouracilt és az oxaliplatint. Ez az érzékenység, valamint az a képességük, hogy meghatározott körülmények között, például glükózmegvonás vagy olyan induktorokkal való kezelés, mint a butirát, differenciálódási útvonalakat fejlesztenek ki, felbecsülhetetlen értékű modellé teszi őket a sejtdifferenciálódás és a rák progressziójának hátterében álló molekuláris mechanizmusok vizsgálatára.

A HT-29 sejteket továbbá xenograft tumormodellként is használták, ami olyan in vivo vizsgálatokhoz nyújt platformot, amelyek utánozzák a tumor emberi szervezetben való viselkedését. Ez az alkalmazás lehetővé teszi a tumor növekedésének, az áttétképződésnek és a terápiás szerek hatékonyságának in vivo helyzetekben történő feltárását.

Összefoglalva, a HT-29 sejtvonal kulcsfontosságú eszköz az orvosi és biológiai kutatásokban, elősegítve a humán vastagbél adenokarcinóma mélyebb megértését, a rákos sejtek differenciálódásának molekuláris alapjait és a hatékony rákkezelések kifejlesztését.

Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • HT 29
  • HT29

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egereken. Jól differenciált adenokarcinómát képez, amely megfelel a vastagbél elsődleges (I. fokozatú) daganatának, szteroiddal kezelt hörcsögökben is képződik
Kariotípus
A törzsvonal kromoszómaszáma hipertriploid, a 2S komponens 2,4%-ban fordul elő. Tizenhét marker kromoszóma található a legtöbb metafázisban, általában kromoszómánként egyetlen példányban. A markerek jelölései a következők: M1p-(=t(3p-,?) egy törölt rövid karral), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+ és xq-. A 13-as kromoszóma nullizomikus, a 8-as és 14-es kromoszómák pedig általában monoszomikusak. QM sávelemzéssel nem mutattak ki Y kromoszómát.
Kettőzési idő
24 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HT-29 (Cytion katalógusszám: 300215)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Urokináz receptor (u-PAR), D-vitamin (mérsékelt expresszió), nincs kimutatható plazminogén aktivátor aktivitás.
Fehérjeexpresszió
CEA negatív, p53 pozitív
Antigén-expresszió
A vércsoport, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, galaktóz-szeramid (a HIV lehetséges alternatív receptora) sejtfelszíni expressziója
Izoenzimek
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0230
Onkogének
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -, abl -, ros -, src -
Vírusérzékenység
Humán immunhiányos vírus (HIV, LAV)
Termékek
IgA szekréciós összetevője, karcinoembrió antigén (CEA), transzformáló növekedési faktor béta kötő fehérje, mucin, A p53 antigén túltermelődik

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Lassú, a sejteknek nagyjából 48 órára van szükségük ahhoz, hogy letelepedjenek és megtapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
44 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi