Ga naar de inhoud
HT-29-cellen
Weefsel
Kolon
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
HT 29, HT29

Documenten

HT-29-cellen

Cell line · Productnummer 300215

De HT-29-cellijn, afkomstig van een menselijk colorectaal adenocarcinoom van graad II, vormt een hoeksteen in het onderzoek naar darmkanker bij de mens....

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HT-29 cellijn, afgeleid van een graad II humaan colorectaal adenocarcinoom, vormt een hoeksteen van het onderzoeksmodel in de studie van humane darmkankers. De HT22-cellen, afkomstig van een primaire tumor bij een 44-jarige vrouw in 1964, hebben bijgedragen aan een beter begrip van de adhesie- en invasiemechanismen van kankercellen. Als menselijke adenocarcinoomcellijn vertonen HT-29 cellen kenmerken die sterk lijken op die van rijpe darmcellen, zoals enterocyten, wat hun nut onderstreept bij het onderzoeken van de dynamica van voedselvertering en de biologische beschikbaarheid van voedingsstoffen.

HT-29 cellen zijn gevoelig voor conventionele chemotherapieën tegen colorectale kanker, waaronder 5-fluorouracil en oxaliplatin. Deze gevoeligheid, gekoppeld aan hun vermogen om differentiatieroutes tot expressie te brengen onder specifieke omstandigheden, zoals glucosedeprivatie of behandeling met inductoren zoals butyraat, maakt ze tot een model van onschatbare waarde voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan celdifferentiatie en kankerprogressie.

Bovendien zijn HT-29 cellen gebruikt als xenograft tumormodel, wat een platform biedt voor in vivo studies die het gedrag van de tumor in het menselijk lichaam nabootsen. Deze toepassing maakt het mogelijk om tumorgroei, metastase en de werkzaamheid van therapeutische middelen in in vivo situaties te onderzoeken.

Samengevat is de HT-29 cellijn een centraal instrument in medisch en biologisch onderzoek, dat een beter begrip van het humane colon adenocarcinoom, de moleculaire basis van differentiatie van kankercellen en de ontwikkeling van effectieve kankerbehandelingen mogelijk maakt.

Weefsel
Kolon
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • HT 29
  • HT29

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen. Vormt goed gedifferentieerd adenocarcinoom consistent met colon primair (graad I), tumoren vormen zich ook in met steroïden behandelde hamsters
Karyotype
Het aantal stamlijnchromosomen is hypertriploïd met een 2S-component van 2,4%. In de meeste metafasen worden zeventien markerchromosomen gevonden, meestal in één kopie per chromosoom. De markeraanduidingen zijn: M1p-(=t(3p-,?) met een verwijderde korte arm), t(7q,?), t(10q,?), i(13q), 19q+a. M6, ?t(8q,9q-), ?xp, M9, 6q+, t(13,?)a, t(13,?)b, 19q+b, M14, M15, 15p+, en xq-. Chromosoom 13 is nullisomisch en chromosomen 8 en 14 zijn over het algemeen monosomisch. Er werd geen Y-chromosoom gedetecteerd met QM-bandanalyse.
Verdubbelingstijd
24 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HT-29 (Cytion catalogusnummer 300215)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0320

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Urokinase receptor(u-PAR), vitamine D (matige expressie), geen detecteerbare plasminogeen activator activiteit.
Eiwit-expressie
CEA negatief, p53 positief
Antigeenexpressie
Bloedgroep A, Rh+, HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, CD4 -, celoppervlakexpressie van galactose ceramide (een mogelijke alternatieve receptor voor HIV)
Iso-enzymen
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0230
Oncogenen
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl -, ros -, src -
Gevoeligheid voor virussen
Humaan immunodeficiëntievirus (HIV, LAV)
Producten
Secreet bestanddeel van IgA, carcino-embryonaal antigeen (CEA), bindend eiwit voor transformerende groeifactor bèta, mucine, Het p53-antigeen wordt overgeproduceerd

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Langzaam hebben de cellen ongeveer 48 uur nodig om zich te vestigen en te hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
44 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch