Preskoči na vsebino
Celice Caco-2
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumenti

Celice Caco-2

Cell line · Številka izdelka 300137

Celice Caco-2 služijo kot napreden in vitro model človeške črevesne pregrade, predvsem zaradi njihove diferenciacije v celični monosloj, ki se zapre...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice Caco-2 so napreden in vitro model za človeško črevesno pregrado, predvsem zaradi njihove diferenciacije v celični monosloj, ki je zelo podoben enterocitom, ki obdajajo tanko črevo. Pri gojenju celične linije Caco2 na filtrirnih vložkih za tkivne kulture s polikarbonatnimi filtri se celice Caco-2 spontano diferencirajo. Diferenciacija celic Caco2 povzroči izražanje specializiranih celičnih tipov z mikroviliji, encimi in prenašalci, kar je podobno zapletenim značilnostim in mehanizmom, ki jih najdemo v razmerah in vivo.

V okviru modelov študij črevesne absorpcije so celice Caco-2, ki so bile pridobljene iz človeškega bolnika z adenokarcinomom debelega črevesa in danke, koristne zaradi svoje sposobnosti doseganja visokih vrednosti TEER, kar kaže na nepoškodovane tesne spoje in funkcijo epitelijske pregrade. Te lastnosti so ključne za teste, kot je test izliva holesterola, in raziskave celičnega transporta, vključno s premikanjem lipidnih nanodelcev in ugotavljanjem interakcij med beljakovinami.

Celice Caco-2 so ključne za študije absorpcije v črevesju, saj zagotavljajo zanesljiv in vitro približek črevesnega epitelija. Te celice, ki posnemajo črevesne enterocite, olajšajo analize peroralne absorpcije zdravil, saj simulirajo črevesno pregrado. Raziskovalci uporabljajo celice Caco-2 za napovedovanje, kako snovi prehajajo črevesno sluznico, kar je bistveno za farmakokinetično profiliranje peroralnih zdravil. Poleg tega so ključno orodje pri raziskovanju črevesnega privzema, homeostaze in transporta holesterola, ki so ključni procesi za razumevanje presnove lipidov in z njo povezanih bolezni.

Celice Caco-2 ostajajo temelj raziskav karcinoma debelega črevesa in toksikologije, ne le zaradi njihovega pomena za študije prebavil pri ljudeh, temveč tudi zaradi njihove vloge pri zagotavljanju podrobnega vpogleda v žolčno pot, presnovo ksenobiotikov v debelem črevesu, raziskave raka in toksikologijo.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Uporaba
Model gastrointestinalnega trakta, merjenje transepitelijskega/endotelijskega električnega upora (TEER). Celice Caco-2 razvijejo visoke vrednosti TEER do 2000 cm2 (izmerjeno s CLS z uporabo CellZscope, nanoAnalytics, Münster, Nemčija).
Sinonimi
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših. Tvorijo zmerno dobro diferencirane adenokarcinome, ki so skladni s primarnim debelim črevesom (razred II)
Ploidnost
(P14), hipertetraploidni
Stanje MSI
Stabilno (MSS)
Čas podvojitve
60 do 70 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
CaCo-2 (kataloška številka Cytion 300137)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Toplotno stabilni enterotoksin (Sta, E. coli), epidermalni rastni faktor (EGF), protein I, ki veže retinojsko kislino, in protein II, ki veže retinol, keratin pozitiven.
Ekspresija antigena
Krvna skupina O, Rh+, HLA razreda II negativen
Izoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Odpornost proti virusom
Virus človeške imunske pomanjkljivosti (HIV, LAV)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh povzročilo 90 % konfluentno monoslojno plast.
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
72 let
Etnična pripadnost
Kavkaški