Pereiti prie turinio
Caco-2 ląstelės
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumentai

Caco-2 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300137

Caco-2 ląstelės yra pažangus žmogaus žarnyno barjero in vitro modelis, visų pirma dėl to, kad jos diferencijuojasi į ląstelių monosluoksnį, kuris uždengia...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Caco-2 ląstelės yra pažangus žmogaus žarnyno barjero in vitro modelis, visų pirma dėl to, kad jos diferencijuojasi į ląstelių monosluoksnį, kuris labai panašus į plonąją žarną dengiančius enterocitus. Auginant Caco-2 ląstelių liniją ant audinių kultūrų filtrų įdėklų su polikarbonato filtrais, Caco-2 ląstelės spontaniškai diferencijuojasi. Diferencijuojantis Caco2 ląstelėms, susiformuoja specializuoti ląstelių tipai su mikroelementais, fermentais ir pernešėjais, kurie atitinka sudėtingas in vivo ląstelių savybes ir mechanizmus.

Žarnyno absorbcijos tyrimų modeliuose Caco-2 ląstelės, gautos iš žmogaus, sergančio storosios žarnos adenokarcinoma, yra labai svarbios dėl jų gebėjimo pasiekti aukštas TEER vertes, kurios rodo nepažeistas sandarias jungtis ir epitelio barjero funkciją. Šios savybės labai svarbios atliekant tokius tyrimus kaip cholesterolio nutekėjimo tyrimas ir ląstelių pernašos tyrimai, įskaitant lipidų nanodalelių judėjimą ir baltymų sąveikos nustatymą.

Caco-2 ląstelės yra labai svarbios žarnyno absorbcijos tyrimams, nes jos yra patikimas žarnyno epitelio aproksimacijos in vitro pavyzdys. Šios ląstelės imituoja žarnyno enterocitus, todėl, imituodamos žarnyno barjerą, palengvina geriamųjų vaistų absorbcijos tyrimus. Tyrėjai naudoja Caco-2 ląsteles, norėdami nuspėti, kaip medžiagos keliauja per žarnyno gleivinę, o tai labai svarbu geriamųjų vaistų farmakokinetiniam profiliavimui. Be to, jos yra pagrindinė priemonė tiriant cholesterolio pasisavinimą, homeostazę ir pernešimą žarnyne, o tai yra labai svarbūs procesai, padedantys suprasti lipidų apykaitą ir su ja susijusias ligas.

Caco-2 ląstelės išlieka kertiniu akmeniu storosios žarnos karcinomos ir toksikologijos tyrimuose ne tik dėl jų svarbos žmogaus virškinamojo trakto tyrimams, bet ir dėl to, kad jos padeda išsamiai susipažinti su tulžies keliu, ksenobiotikų metabolizmu storojoje žarnoje, vėžio ir toksikologijos tyrimais.

Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Paraiškos
Virškinamojo trakto modelis, matuojamas transepitelinis ir endotelio elektrinis pasipriešinimas (TEER). Caco-2 ląstelės pasižymi didelėmis TEER vertėmis, siekiančiomis iki 2000 cm2 (matuojama CLS naudojant CellZscope, nanoAnalytics, Miunsteris, Vokietija).
Sinonimai
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms. Formuoja vidutiniškai gerai diferencijuotas adenokarcinomas, atitinkančias pirmines storosios žarnos (II laipsnio)
Ploidijos būklė
(P14), hipertetraploidinis
MSI būsena
Stabilus (MSS)
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
60-70 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
CaCo-2 (Cytion katalogo numeris 300137)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
Šiluminiu požiūriu stabilus enterotoksinas (Sta, E. coli), epidermio augimo faktorius (EGF), retinoinę rūgštį jungiantis baltymas I ir retinolį jungiantis baltymas II, keratinas teigiamas.
Antigeno ekspresija
Kraujo grupė O, Rh+, HLA II klasės neigiama
Izofermentai
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Atsparumas virusams
Žmogaus imunodeficito virusas (ŽIV, LAV)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys 90 % konfluentinį monosluoksnį.
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
72 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių