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Caco-2細胞
ティッシュ
コロン
病気
腺癌
同義語
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Caco-2細胞

Cell line · 製品番号 300137

Caco-2細胞は、主に細胞単層を形成して閉鎖する特性を持つことから、ヒトの腸管バリアの高度なin vitroモデルとして機能している...

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01概要

説明

Caco-2細胞は、主に小腸を裏打ちする腸細胞に酷似した細胞単層に分化することから、ヒト腸管バリアの高度なin vitroモデルとして役立っている。Caco2細胞株をポリカーボネートフィルター付きの組織培養フィルターインサート上で培養すると、Caco2細胞は自然分化を起こす。Caco2細胞の分化の結果、微絨毛、酵素、トランスポーターを備えた特殊な細胞型が発現し、生体内で見られる複雑な特徴やメカニズムと類似する。

腸管吸収研究モデルの文脈では、ヒト大腸腺がん患者由来のCaco-2細胞は、無傷のタイトジャンクションと上皮バリア機能を示す高いTEER値を発現する能力により、重要な役割を果たしている。これらの特性は、コレステロール排出アッセイのようなアッセイや、脂質ナノ粒子の移動やタンパク質相互作用の検出を含む細胞輸送の調査にとって極めて重要である。

Caco-2細胞は、腸管上皮の信頼性の高いin vitro近似を提供し、腸管吸収研究にとって極めて重要である。腸管細胞を模倣したこの細胞は、腸関門をシミュレートすることで経口薬物吸収の解析を容易にする。研究者はCaco-2細胞を利用して、物質が腸粘膜をどのように通過するかを予測し、これは経口薬の薬物動態プロファイリングに不可欠である。さらに、Caco-2細胞は腸管コレステロールの取り込み、恒常性、輸送を研究する上で重要なツールであり、脂質代謝と関連疾患を理解する上で不可欠なプロセスである。

Caco-2細胞は、ヒトの消化管研究との関連性だけでなく、胆道経路、大腸内での異種物質の代謝、癌および毒性学的研究に対する詳細な洞察を提供する役割のために、大腸癌および毒性学的研究の礎石であり続けている。

ティッシュ
コロン
病気
腺癌
用途
GI(消化管)モデル、経上皮/内皮電気抵抗(TEER)の測定。Caco-2細胞は、最大2000cm2という高いTEER値を示す(CellZscope、nanoAnalytics社製、ドイツ・ミュンスター、CLSによる測定)。
同義語
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。大腸原発の中等度高分化腺癌を形成(グレードII)
倍数性
(P14)、4倍体
MSIの状態
安定(MSS)
倍増時間
60~70時間

04識別子

引用
CaCo-2 (Cytion カタログ番号 300137)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0025

05発現と感受性

発現している受容体
熱安定性エンテロトキシン(Sta、大腸菌)、上皮成長因子(EGF)、レチノイン酸結合タンパク質Iおよびレチノール結合タンパク質II、ケラチン陽性。
抗原発現
血液型O型、Rh+、HLAクラスII陰性
アイソザイム
Me-2、1、PGM3、1、PGM1、1、ES-D、1、AK-1、1、GLO-1、1、G6PD、B。
ウイルス耐性
ヒト免疫不全ウイルス(HIV、LAV)

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1×10⁴細胞/cm²の播種密度では、約4日で90%のコンフルエント単層が形成される
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
72年
民族
白人