Caco-2-celler

Caco-2-celler er en avansert in vitro-modell for den humane tarmbarrieren, først og fremst fordi de kan differensieres til et cellelag som ligner på enterocyttene i tynntarmen. Ved dyrking av Caco2-cellelinjen på vevskulturfilterinnlegg med polykarbonatfiltre gjennomgår Caco-2-celler spontan differensiering. Differensieringen av Caco2-celler resulterer i uttrykk av spesialiserte celletyper, komplett med mikrovilli, enzymer og transportører, noe som er en parallell til de komplekse funksjonene og mekanismene som finnes i en in vivo-situasjon.

I forbindelse med modeller for studier av tarmabsorpsjon er Caco-2-celler, som stammer fra en human kolorektal adenokarsinom-pasient, viktige på grunn av deres evne til å utvikle høye TEER-verdier, noe som tyder på intakte tight junctions og epitelbarrierefunksjon. Disse egenskapene er avgjørende for analyser som kolesterolutstrømmingsanalysen og undersøkelser av celletransport, inkludert bevegelse av lipidnanopartikler og påvisning av proteininteraksjoner.

Caco-2-celler er avgjørende for studier av tarmabsorpsjon, ettersom de gir en pålitelig in vitro-tilnærming av tarmepitelet. Disse cellene etterligner tarmens enterocytter og gjør det enklere å analysere oral legemiddelabsorpsjon ved å simulere tarmbarrieren. Forskere bruker Caco-2-celler til å forutsi hvordan stoffer passerer tarmslimhinnen, noe som er avgjørende for den farmakokinetiske profileringen av orale legemidler. Caco-2-celler er også et viktig verktøy for å undersøke opptak, homeostase og transport av kolesterol i tarmen, noe som er avgjørende for å forstå lipidmetabolismen og tilknyttede sykdommer.

Caco-2-celler er fortsatt en hjørnestein i forskning på tykktarmskarsinom og toksikologi, ikke bare på grunn av sin relevans for gastrointestinale studier på mennesker, men også fordi de gir detaljert innsikt i galleveiene, metabolismen av xenobiotika i tykktarmen, kreft og toksikologisk forskning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring