Cellules Caco-2

Les cellules Caco-2 servent de modèle in vitro avancé pour la barrière intestinale humaine, principalement en raison de leur différenciation en une monocouche cellulaire qui ressemble étroitement aux entérocytes qui tapissent l'intestin grêle. Lors de la culture de la lignée cellulaire Caco2 sur des inserts de filtre de culture tissulaire avec des filtres en polycarbonate, les cellules Caco2 subissent une différenciation spontanée. La différenciation des cellules Caco2 se traduit par l'expression de types cellulaires spécialisés, dotés de microvillosités, d'enzymes et de transporteurs, parallèlement aux caractéristiques et mécanismes complexes observés dans une situation in vivo.

Dans le contexte des modèles d'étude de l'absorption intestinale, les cellules Caco-2, dérivées d'un adénocarcinome colorectal humain, jouent un rôle essentiel en raison de leur capacité à développer des valeurs TEER élevées, ce qui signifie que les jonctions serrées et la fonction de barrière épithéliale sont intactes. Ces propriétés sont cruciales pour des essais tels que l'essai d'efflux de cholestérol et les recherches sur le transport cellulaire, y compris le mouvement des nanoparticules lipidiques et la détection des interactions protéiques.

Les cellules Caco-2 sont essentielles pour les études sur l'absorption intestinale, car elles constituent une approximation in vitro fiable de l'épithélium intestinal. Mimant les entérocytes intestinaux, ces cellules facilitent l'analyse de l'absorption orale des médicaments en simulant la barrière intestinale. Les chercheurs utilisent les cellules Caco-2 pour prédire comment les substances traversent la muqueuse intestinale, ce qui est essentiel pour l'établissement du profil pharmacocinétique des médicaments administrés par voie orale. En outre, les cellules Caco-2 sont un outil essentiel pour étudier l'absorption, l'homéostasie et le transport du cholestérol dans l'intestin, des processus vitaux pour comprendre le métabolisme des lipides et les maladies qui y sont associées.

Les cellules Caco-2 restent une pierre angulaire de la recherche sur le carcinome du côlon et la toxicologie, non seulement en raison de leur pertinence pour les études gastro-intestinales humaines, mais aussi parce qu'elles fournissent des informations détaillées sur la voie biliaire, le métabolisme des xénobiotiques dans le côlon, la recherche sur le cancer et la toxicologie.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie