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Cellules HCT116
Tissu
Colorectal
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

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Cellules HCT116

Cell line · Référence du produit 300195

Les cellules HCT116, isolées chez un patient atteint d'un cancer du côlon, jouent un rôle crucial dans les études thérapeutiques et le criblage de médicaments, en particulier dans la recherche sur le cancer du côlon...

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01Informations générales

Description

Les cellules HCT116, isolées à partir d'un patient atteint d'un cancer du côlon, jouent un rôle crucial dans les études thérapeutiques et les criblages de médicaments, en particulier dans la recherche sur le cancer du côlon. Les cellules HCT-116 sont reconnues pour une mutation dans le codon 13 du proto-oncogène KRAS, ce qui souligne leur utilité dans la recherche sur la thérapie génique, d'autant plus qu'elles se prêtent à la transfection avec des vecteurs viraux. Dans la recherche sur l'apoptose, les cellules HCT116 sont essentielles pour étudier les mécanismes de l'apoptose et de la mort cellulaire.

Les effets du butyrate, un acide gras à chaîne courte, ont été largement étudiés dans les cellules HCT116, révélant que le butyrate inhibe la prolifération du cancer du côlon en induisant l'apoptose, ce qui met en évidence l'interaction complexe cancer-cellule et les implications plus larges pour la recherche sur le cancer. Le rôle du butyrate dans la modulation des changements d'expression génique et l'induction de la réponse au stress du réticulum endoplasmique dans les cellules HCT116 souligne la complexité cellulaire des lignées de cellules cancéreuses colorectales.

L'interaction entre les cellules cancéreuses du côlon HCT116 et des agents thérapeutiques tels que la metformine, connue pour son effet de legs et son potentiel de réduction du risque de cancer, est d'un grand intérêt. L'influence de la metformine sur la prolifération des cellules du côlon HCT116, la modulation du niveau de la protéine p21 et ses implications plus larges sur la prolifération et la croissance offrent des perspectives pour la gestion des tumeurs primaires et la prévention des tumeurs et des métastases.

Les cellules HCT116 sont d'une valeur inestimable pour la recherche oncologique, car elles fournissent des informations essentielles sur l'efficacité des traitements et la dynamique moléculaire de la progression du cancer. Avec une mutation KRAS notable et une sensibilité à la transfection, ces cellules facilitent les études de thérapie génique, l'analyse de l'apoptose et les stratégies de traitement et de prévention du cancer colorectal.

Tissu
Colorectal
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, chez la souris nude (inoculum de 5-10 x 106 cellules)
Statut de ploïdie
Aneuploïde
État du MSI
Instable (MSI-haut)
Caryotype
Le caryotype des cellules HCT116 est presque diploïde, 70% des cellules abritant 45 chromosomes, avec souvent une surreprésentation des chromosomes 8, 10, 16 et 17 sur les bras longs, ainsi que l'absence du chromosome Y.
Temps de doublement
25 à 35 heures

04Identifiants

Référence
HCT116 (numéro de catalogue Cytion 300195)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Les cellules sont positives pour la kératine par coloration immunoperoxydase. Les cellules HCT 116 sont positives pour l'expression du facteur de croissance transformant bêta 1 (TGF bêta 1) et bêta 2 (TGF bêta 2).

06Manipulation et culture

Milieu de culture
McCoys 5a, w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820200a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
1 à 2 fois par semaine
Récupération après le dégel
3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
48 ans
Origine ethnique
Caucasien