
- Tissue
- קולורקטלי
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2
Documents
01General information
- Description
תאי HCT116, המבודדים מחולה בסרטן המעי הגס, ממלאים תפקיד מכריע במחקרים טיפוליים ובבדיקות תרופות, במיוחד במחקר על סרטן המעי הגס. תאי HCT-116 מוכרים בזכות מוטציה בקודון 13 של פרוטו-אונקוגן KRAS, מה שמדגיש את השימושיות שלהם במחקר בתחום הטיפול הגנטי, במיוחד מכיוון שהם ניתנים להחדרה באמצעות וקטורים נגיפיים. במחקר בתחום האפופטוזיס, תאי HCT116 הם מרכזיים לחקר המנגנונים של אפופטוזיס ומוות תאי.
ההשפעות של בוטיראט, חומצת שומן קצרת שרשרת, נחקרו בהרחבה בתאי HCT116, וחשפו כי בוטיראט מעכב את התפשטות סרטן המעי הגס על ידי גרימת אפופטוזיס, מה שמדגיש את האינטראקציה המורכבת בין תאי הסרטן ואת ההשלכות הרחבות יותר על מחקר הסרטן. תפקידו של בוטיראט בוויסות שינויים בביטוי גנים ובגרימת תגובת לחץ ברשתית האנדופלזמית בתאי HCT116 מדגיש את המורכבות התאית בקווי תאים של סרטן המעי הגס.
האינטראקציה בין תאי סרטן המעי הגס HCT116 לבין חומרים טיפוליים כמו מטפורמין, הידוע בהשפעתו ארוכת הטווח ובפוטנציאל שלו להפחתת הסיכון לסרטן, מעוררת עניין רב. השפעת המטפורמין על התפשטות תאי המעי הגס HCT116, ויסות רמת החלבון p21 והשלכותיו הרחבות יותר על התפשטות וצמיחה מספקות תובנות לגבי הטיפול בגידולים ראשוניים ומניעת גידולים וגרורות.
תאי HCT116 הם בעלי ערך רב למחקר אונקולוגי, ומספקים תובנות קריטיות לגבי היעילות של טיפולים והדינמיקה המולקולרית של התקדמות הסרטן. עם מוטציה KRAS בולטת ורגישות לטרנספקציה, תאים אלה מקלים על מחקרים בטיפול גנטי, ניתוח אפופטוזיס ואסטרטגיות לטיפול ומניעה של סרטן המעי הגס.
- Tissue
- קולורקטלי
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- HCT-116
- HCT.116
- HCT_116
- HCT 116
- CoCL2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים (תרבית של 5-10 x 106 תאים)
- Ploidy status
- אנאופלואידי
- MSI status
- לא יציב (MSI גבוה)
- Karyotype
- הקריוטיפ של תאי HCT116 הוא כמעט דיפלואידי, כאשר 70% מהתאים מכילים 45 כרומוזומים, ולעתים קרובות מראים ייצוג יתר של כרומוזומים 8, 10, 16 ו-17 בזרועות הארוכות, יחד עם היעדרות כרומוזום Y.
- Doubling time
- 25 עד 35 שעות
04Identifiers
- Citation
- HCT116 (מספר קטלוגי Cytion 300195)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0291
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- התאים חיוביים לקרטין על פי צביעת אימונופרוקסידאז. תאי HCT 116 חיוביים לביטוי של גורם גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF בטא 1) ובטא 2 (TGF בטא 2).
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 1 עד 2 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- 3 ימים
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 48 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
