Skip to content
เซลล์ HCT116
Tissue
ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Documents

เซลล์ HCT116

Cell line · Product number 300195

HCT116 cells, isolated from a colon cancer patient, serve a crucial role in therapeutic studies and drug screenings, particularly in colon cancer research...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ HCT116 ซึ่งแยกได้จากผู้ป่วยโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่ มีบทบาทสำคัญในการศึกษาการรักษาและการคัดกรองยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่เซลล์ HCT-116 เป็นที่รู้จักจากการกลายพันธุ์ในโคดอนที่ 13 ของยีน KRAS proto-oncogene ซึ่งเน้นย้ำถึงประโยชน์ในการวิจัยด้านการบำบัดด้วยยีน โดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื่องจากเซลล์เหล่านี้สามารถรับการถ่ายโอนยีนด้วยเวกเตอร์ไวรัสได้ ในการวิจัยเกี่ยวกับการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส เซลล์ HCT116 มีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาวิถีและกลไกของการเกิดอะพอพโทซิสและการตายของเซลล์

ผลของบิวทิเรต ซึ่งเป็นกรดไขมันสายสั้น ได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางในเซลล์ HCT116 โดยพบว่าบิวทิเรตสามารถยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ได้โดยการกระตุ้นกระบวนการอะพอพโทซิส ซึ่งเน้นย้ำถึงความซับซ้อนของปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์มะเร็งและผลกระทบในวงกว้างต่อการวิจัยโรคมะเร็ง บทบาทของบิวทิเรตในการปรับเปลี่ยนการแสดงออกของยีนและการกระตุ้นการตอบสนองต่อภาวะเครียดของเอนโดพลาสมิกเรติคูลัมในเซลล์ HCT116 ยังตอกย้ำถึงความซับซ้อนในระดับเซลล์ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักอีกด้วย

ปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HCT116 กับสารบำบัดเช่นเมตฟอร์มิน ซึ่งเป็นที่รู้จักจากผลระยะยาวและศักยภาพในการลดความเสี่ยงของมะเร็ง เป็นเรื่องที่น่าสนใจอย่างยิ่ง อิทธิพลของเมตฟอร์มินต่อการเพิ่มจำนวนเซลล์ลำไส้ใหญ่ HCT116 การปรับระดับโปรตีน p21 และผลกระทบที่กว้างขึ้นต่อการเพิ่มจำนวนและการเจริญเติบโตของเซลล์ นำไปสู่ความเข้าใจในการจัดการกับเนื้องอกปฐมภูมิและการป้องกันเนื้องอกและการแพร่กระจาย

เซลล์ HCT116 มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยด้านมะเร็งวิทยา โดยให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับประสิทธิภาพของยาและการเปลี่ยนแปลงทางโมเลกุลของการลุกลามของมะเร็ง ด้วยลักษณะการกลายพันธุ์ของ KRAS ที่โดดเด่นและความไวต่อการถ่ายโอนยีน เซลล์เหล่านี้ช่วยในการศึกษาการบำบัดด้วยยีน การวิเคราะห์การตายของเซลล์ และการพัฒนากลยุทธ์การรักษาและป้องกันมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

Tissue
ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน (ฉีดเชื้อ 5-10 x 10^6 เซลล์)
Ploidy status
อะนีพลอยด์
MSI status
ไม่เสถียร (MSI สูง)
Karyotype
ลักษณะทางโครโมโซมของเซลล์ HCT116 เกือบจะเป็นแบบไดพลอยด์ โดยมีเซลล์ร้อยละ 70 ที่มีโครโมโซม 45 แท่ง ซึ่งมักพบว่ามีโครโมโซม 8, 10, 16 และ 17 มากเกินไปในแขนยาวของโครโมโซม และไม่มีโครโมโซม Y
Doubling time
25 ถึง 35 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HCT116 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300195)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Expression and susceptibility

Antigen expression
เซลล์มีผลบวกต่อเคราตินโดยการย้อมด้วยวิธีอิมมูโนเปอร์ออกซิเดส เซลล์ HCT 116 มีผลบวกต่อการแสดงออกของทรานส์ฟอร์มมิง โกรท แฟคเตอร์ เบต้า 1 (TGF beta 1) และเบต้า 2 (TGF beta 2)

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
3 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
48 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน