Siirry sisältöön
HCT116-solut
Kudos
Kolorektaali
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Asiakirjat

HCT116-solut

Cell line · Tuotenumero 300195

Paksusuolisyöpäpotilaalta eristetyt HCT116-solut ovat keskeisessä asemassa terapeuttisissa tutkimuksissa ja lääkeaineiden seulonnassa, erityisesti paksusuolisyövän tutkimuksessa...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCT116-solut, jotka on eristetty paksusuolisyöpäpotilaasta, ovat ratkaisevassa asemassa terapeuttisissa tutkimuksissa ja lääkeaineiden seulonnassa, erityisesti paksusuolisyövän tutkimuksessa. HCT-116-solut tunnistetaan mutaatiosta KRAS-proto-onkogeenin kodonissa 13, mikä korostaa niiden hyödyllisyyttä geeniterapiatutkimuksessa, erityisesti koska ne voidaan transfektoida virusvektoreilla. Apoptoositutkimuksessa HCT116-solut ovat keskeisiä apoptoosin ja solukuoleman mekanismien tutkimisessa.

Lyhytketjuisen rasvahapon, butyraatin, vaikutuksia on tutkittu laajasti HCT116-soluissa, ja on käynyt ilmi, että butyraatti estää paksusuolen syövän lisääntymistä indusoimalla apoptoosia, mikä korostaa syövän ja solujen monimutkaista vuorovaikutusta ja laajempia vaikutuksia syöpätutkimukseen. Butyraatin rooli geeniekspressiomuutosten moduloinnissa ja endoplasmisen retikulumin stressivasteen indusoimisessa HCT116-soluissa korostaa paksusuolen syövän solulinjojen solujen monimutkaisuutta.

HCT116-paksusuolen syöpäsolujen ja terapeuttisten aineiden, kuten metformiinin, joka tunnetaan perintövaikutuksestaan ja mahdollisuudestaan vähentää syöpäriskiä, välinen vuorovaikutus on huomattavan kiinnostava. Metformiinin vaikutus HCT116-paksusuolisolujen proliferaatioon, p21-proteiinitason modulaatio ja sen laajemmat vaikutukset proliferaatioon ja kasvuun tarjoavat näkemyksiä primaarikasvainten hoitoon sekä kasvainten ja etäpesäkkeiden ehkäisyyn.

HCT116-solut ovat korvaamattoman arvokkaita onkologisessa tutkimuksessa, sillä ne tarjoavat kriittistä tietoa terapeuttisten aineiden tehokkuudesta ja syövän etenemisen molekyylidynamiikasta. Koska näillä soluilla on huomattava KRAS-mutaatio ja ne ovat alttiita transfektiolle, ne helpottavat geeniterapiatutkimuksia, apoptoosianalyysejä sekä paksu- ja peräsuolisyövän hoito- ja ennaltaehkäisystrategioita.

Kudos
Kolorektaali
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä (5-10 x 106 solun inokulaatio)
Ploidisuus
Aneuploidinen
MSI-tila
Epävakaa (MSI-korkea)
Karyotyyppi
HCT116-solujen karyotyyppi on lähes diploidi, ja 70 prosentilla soluista on 45 kromosomia, ja usein kromosomit 8, 10, 16 ja 17 ovat yliedustettuina pitkissä käsivarsissa, ja Y-kromosomi puuttuu.
Kaksinkertaistumisaika
25-35 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCT116 (Cytionin luettelonumero 300195)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Solut ovat positiivisia keratiinille immunoperoksidaasivärjäyksessä. HCT 116 -solut ovat positiivisia transformoivan kasvutekijä beeta 1:n (TGF beeta 1) ja beeta 2:n (TGF beeta 2) ilmentymisen suhteen.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
1-2 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
3 päivää
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
48 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen