Preskoči na vsebino
Celice HCT116
Tkivo
Kolorektalno
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Dokumenti

Celice HCT116

Cell line · Številka izdelka 300195

Celice HCT116, izolirane iz bolnika z rakom debelega črevesa, imajo ključno vlogo v terapevtskih študijah in presejalnih testih zdravil, zlasti v raziskavah raka debelega črevesa...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice HCT116, izolirane od bolnika z rakom debelega črevesa, imajo ključno vlogo v terapevtskih študijah in testiranju zdravil, zlasti pri raziskavah raka debelega črevesa. Celice HCT-116 so prepoznane zaradi mutacije v kodonu 13 protoonkogena KRAS, kar poudarja njihovo uporabnost pri raziskavah genskega zdravljenja, zlasti ker jih je mogoče transficirati z virusnimi vektorji. Pri raziskavah apoptoze so celice HCT116 ključne za preučevanje mehanizmov apoptoze in celične smrti.

Učinki butirata, kratkoverižne maščobne kisline, so bili obsežno preučeni v celicah HCT116 in razkrili, da butirat zavira proliferacijo raka debelega črevesa z indukcijo apoptoze, kar poudarja zapleteno interakcijo med rakom in celicami ter širše posledice za raziskave raka. Vloga butirata pri modulaciji sprememb v izražanju genov in indukciji stresnega odziva endoplazemskega retikuluma v celicah HCT116 poudarja kompleksnost celic v celičnih linijah raka debelega črevesa in danke.

Zelo zanimiva je interakcija med celicami raka debelega črevesa HCT116 in terapevtskimi sredstvi, kot je metformin, ki je znan po svojem zapuščinskem učinku in potencialu za zmanjšanje tveganja za nastanek raka. Vpliv metformina na proliferacijo celic debelega črevesa HCT116, modulacijo ravni proteina p21 ter njegove širše posledice na proliferacijo in rast ponujajo vpogled v zdravljenje primarnih tumorjev ter preprečevanje nastanka tumorjev in metastaz.

Celice HCT116 so neprecenljive za onkološke raziskave, saj zagotavljajo kritičen vpogled v učinkovitost terapevtikov in molekularno dinamiko napredovanja raka. Zaradi opazne mutacije KRAS in dovzetnosti za transfekcijo te celice omogočajo študije genskega zdravljenja, analizo apoptoze ter strategije zdravljenja in preprečevanja kolorektalnega raka.

Tkivo
Kolorektalno
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri golih miših (inokulacija 5-10 x 106 celic)
Ploidnost
Aneuploidni
Stanje MSI
Nestabilen (visok MSI)
Kariotip
Kariotip celic HCT116 je skoraj diploiden, 70 % celic ima 45 kromosomov, pri čemer so na dolgih rokah pogosto pretirano zastopani kromosomi 8, 10, 16 in 17, kromosoma Y pa ni.
Čas podvojitve
25 do 35 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HCT116 (kataloška številka Cytion 300195)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Celice so z imunoperoksidaznim barvanjem pozitivne na keratin. Celice HCT 116 so pozitivne na izražanje transformativnega rastnega faktorja beta 1 (TGF beta 1) in beta 2 (TGF beta 2).

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glukoze, w: stabilen glutamin, w: 2,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820200a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
3 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
48 let
Etnična pripadnost
Kavkaški