
- Tissue
- Colorretal
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2
Documents
01General information
- Description
As células HCT116, isoladas de um paciente com câncer de cólon, desempenham um papel crucial em estudos terapêuticos e triagens de medicamentos, particularmente na pesquisa sobre o câncer de cólon. As células HCT-116 são conhecidas por apresentarem uma mutação no códon 13 do proto-oncogene KRAS, o que destaca sua utilidade na pesquisa em terapia gênica, especialmente por serem passíveis de transfecção com vetores virais. Na pesquisa sobre apoptose, as células HCT116 são fundamentais para o estudo dos mecanismos de apoptose e morte celular.
Os efeitos do butirato, um ácido graxo de cadeia curta, têm sido amplamente estudados nas células HCT-116, revelando que o butirato inibe a proliferação do câncer de cólon ao induzir a apoptose, destacando a complexa interação das células cancerosas e as implicações mais amplas para a pesquisa sobre o câncer. O papel do butirato na modulação das alterações na expressão gênica e na indução da resposta ao estresse do retículo endoplasmático nas células HCT116 ressalta a complexidade celular nas linhagens de células de câncer colorretal.
A interação entre as células de câncer de cólon HCT116 e agentes terapêuticos como a metformina, conhecida por seu efeito benéfico e potencial para reduzir o risco de câncer, é de grande interesse. A influência da metformina na proliferação das células de cólon HCT116, na modulação do nível da proteína p21 e suas implicações mais amplas sobre a proliferação e o crescimento oferecem insights para o manejo de tumores primários e a prevenção de tumores e metástases.
As células HCT116 são inestimáveis para a pesquisa oncológica, fornecendo insights críticos sobre a eficácia de terapêuticas e a dinâmica molecular da progressão do câncer. Com uma mutação notável no gene KRAS e suscetibilidade à transfecção, essas células facilitam estudos de terapia gênica, análise de apoptose e estratégias de tratamento e prevenção do câncer colorretal.
- Tissue
- Colorretal
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCT-116
- HCT.116
- HCT_116
- HCT 116
- CoCL2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sim, em camundongos nude (inóculo de 5 a 10 × 10⁶ células)
- Ploidy status
- Aneuploide
- MSI status
- Instável (MSI alto)
- Karyotype
- O cariótipo das células HCT116 é quase diplóide, com 70% das células apresentando 45 cromossomos, frequentemente com uma super-representação dos cromossomos 8, 10, 16 e 17 nos braços longos, além da ausência do cromossomo Y.
- Doubling time
- 25 a 35 horas
04Identifiers
- Citation
- HCT116 (número de catálogo da Cytion 300195)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0291
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- As células apresentam resultado positivo para queratina na coloração por imunoperoxidase. As células HCT 116 apresentam expressão positiva do fator de crescimento transformador beta 1 (TGF beta 1) e beta 2 (TGF beta 2).
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, p: 3,0 g/L de glicose, p: glutamina estável, p: 2,0 mM de piruvato de sódio, p: 2,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 2 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 1 a 2 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- 3 dias
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 48 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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