Перейти до вмісту
Клітини HCT116
Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Документи

Клітини HCT116

Cell line · Номер товару 300195

Клітини HCT116, виділені з організму пацієнта з раком товстої кишки, відіграють ключову роль у терапевтичних дослідженнях та скринінгу лікарських засобів, зокрема в дослідженнях раку товстої кишки...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини HCT116, виділені від пацієнта з раком товстої кишки, відіграють важливу роль у терапевтичних дослідженнях та скринінгу лікарських препаратів, особливо в дослідженнях раку товстої кишки. Клітини HCT-116 розпізнаються за мутацією в кодоні 13 протоонкогена KRAS, що підкреслює їх корисність у дослідженнях генної терапії, особливо з огляду на те, що вони піддаються трансфекції вірусними векторами. У дослідженнях апоптозу клітини HCT116 є ключовими для вивчення механізмів апоптозу та загибелі клітин.

Вплив бутирату, коротколанцюгової жирної кислоти, був детально вивчений на клітинах HCT116 і показав, що бутират пригнічує проліферацію раку товстої кишки, індукуючи апоптоз, що підкреслює складну взаємодію раку з клітинами та ширші наслідки для дослідження раку. Роль бутирату в модуляції змін експресії генів та індукції стресової реакції ендоплазматичного ретикулуму в клітинах HCT116 підкреслює клітинну складність клітинних ліній колоректального раку.

Значний інтерес викликає взаємодія між клітинами раку товстої кишки HCT116 і такими терапевтичними засобами, як метформін, відомий своєю протидіабетичною дією і потенціалом зниження ризику розвитку раку. Вплив метформіну на проліферацію клітин HCT116 товстої кишки, модуляцію рівня білка р21 та його ширший вплив на проліферацію і ріст відкривають нові можливості для лікування первинних пухлин та профілактики пухлин і метастазів.

Клітини HCT116 є безцінними для онкологічних досліджень, надаючи критично важливу інформацію про ефективність терапії та молекулярну динаміку прогресування раку. Завдяки значній мутації KRAS та чутливості до трансфекції ці клітини полегшують дослідження генної терапії, аналіз апоптозу, а також стратегії лікування та профілактики колоректального раку.

Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, на голих мишах (інокулят 5-10 x 106 клітин)
Плоїдність
Анеуплоїдний
Статус MSI
Нестабільний (MSI-високий)
Каріотип
Каріотип клітин HCT116 майже диплоїдний, 70% клітин містять 45 хромосом, часто спостерігається надмірне представництво хромосом 8, 10, 16 і 17 на довгих плечах, а також відсутність Y-хромосоми.
Час подвоєння
від 25 до 35 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HCT116 (номер за каталогом Cytion 300195)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0291

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Клітини позитивно реагують на кератин за допомогою імунопероксидазного забарвлення. Клітини HCT 116 позитивні на експресію трансформуючого фактора росту бета 1 (TGF бета 1) і бета 2 (TGF бета 2).

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
McCoys 5a, w: 3,0 г/л Глюкоза, w: стабільна Глютамін, w: 2,0 мМ Піруват натрію, w: 2,2 г/л NaHCO3 (Cytion article number 820200a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2 x 104 клітини/см2
Оновлення рідини
1-2 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
3 дні
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
48 років
Етнічна приналежність
Кавказець