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Cellule HCT116
Tessuto
Colorettale
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

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Cellule HCT116

Cell line · Codice prodotto 300195

Le cellule HCT116, isolate da un paziente affetto da tumore del colon, svolgono un ruolo fondamentale negli studi terapeutici e nella selezione dei farmaci, in particolare nella ricerca sul tumore del colon...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule HCT116, isolate da un paziente affetto da cancro del colon, svolgono un ruolo cruciale negli studi terapeutici e nello screening dei farmaci, in particolare nella ricerca sul cancro del colon. Le cellule HCT-116 sono riconosciute per una mutazione nel codone 13 del proto-oncogene KRAS, evidenziando la loro utilità nella ricerca sulla terapia genica, soprattutto perché sono adattabili alla trasfezione con vettori virali. Nella ricerca sull'apoptosi, le cellule HCT116 sono fondamentali per lo studio dei meccanismi di apoptosi e morte cellulare.

Gli effetti del butirrato, un acido grasso a catena corta, sono stati ampiamente studiati nelle cellule HCT116, rivelando che il butirrato inibisce la proliferazione del cancro del colon inducendo l'apoptosi, evidenziando l'intricata interazione cancro-cellula e le implicazioni più ampie per la ricerca sul cancro. Il ruolo del butirrato nel modulare i cambiamenti di espressione genica e nell'indurre la risposta allo stress del reticolo endoplasmatico nelle cellule HCT116 sottolinea la complessità cellulare delle linee cellulari del cancro del colon-retto.

L'interazione tra le cellule di cancro del colon HCT116 e agenti terapeutici come la metformina, nota per il suo effetto di legacy e per il suo potenziale di riduzione del rischio di cancro, è di notevole interesse. L'influenza della metformina sulla proliferazione delle cellule del colon HCT116, la modulazione del livello della proteina p21 e le sue implicazioni più ampie sulla proliferazione e la crescita offrono spunti per la gestione dei tumori primari e la prevenzione di tumori e metastasi.

Le cellule HCT116 sono preziose per la ricerca oncologica, in quanto forniscono indicazioni critiche sull'efficacia dei farmaci e sulle dinamiche molecolari della progressione del cancro. Grazie alla mutazione KRAS e alla suscettibilità alla trasfezione, queste cellule facilitano gli studi di terapia genica, l'analisi dell'apoptosi e le strategie di trattamento e prevenzione del cancro colorettale.

Tessuto
Colorettale
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi (inoculo di 5-10 x 106 cellule)
Stato di ploidia
Aneuploide
Stato MSI
Instabile (MSI-alto)
Cariotipo
Il cariotipo delle cellule HCT116 è quasi diploide, con il 70% delle cellule che ospitano 45 cromosomi, che spesso mostrano una sovrarappresentazione dei cromosomi 8, 10, 16 e 17 sui bracci lunghi, oltre all'assenza del cromosoma Y.
Tempo di raddoppio
da 25 a 35 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HCT116 (numero di catalogo Cytion 300195)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Le cellule sono positive alla cheratina mediante colorazione con immunoperossidasi. Le cellule HCT 116 sono positive all'espressione del fattore di crescita trasformante beta 1 (TGF beta 1) e beta 2 (TGF beta 2).

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
3 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
48 anni
Etnia
Caucasico