Cellule Caco-2

Le cellule Caco-2 rappresentano un modello avanzato in vitro della barriera intestinale umana, soprattutto grazie alla loro differenziazione in un monostrato cellulare che assomiglia molto agli enterociti che rivestono l'intestino tenue. Quando si coltiva la linea cellulare Caco2 su inserti filtranti per colture tissutali con filtri in policarbonato, le cellule Caco-2 subiscono una differenziazione spontanea. La differenziazione delle cellule Caco2 porta all'espressione di tipi di cellule specializzate, complete di microvilli, enzimi e trasportatori, in parallelo alle caratteristiche e ai meccanismi complessi riscontrati in una situazione in vivo.

Nel contesto dei modelli di studio dell'assorbimento intestinale, le cellule Caco-2, derivate da un paziente affetto da adenocarcinoma del colon-retto umano, sono fondamentali per la loro capacità di sviluppare valori elevati di TEER, che indicano giunzioni strette intatte e funzione di barriera epiteliale. Queste proprietà sono fondamentali per saggi come il saggio di efflusso del colesterolo e per le indagini sul trasporto cellulare, compreso il movimento di nanoparticelle lipidiche e il rilevamento di interazioni proteiche.

Le cellule Caco-2 sono fondamentali per gli studi sull'assorbimento intestinale, in quanto forniscono un'approssimazione affidabile in vitro dell'epitelio intestinale. Imitando gli enterociti intestinali, queste cellule facilitano le analisi dell'assorbimento orale dei farmaci simulando la barriera intestinale. I ricercatori utilizzano le cellule Caco-2 per prevedere come le sostanze attraversano la mucosa intestinale, il che è essenziale per il profilo farmacocinetico dei farmaci orali. Inoltre, sono uno strumento fondamentale per studiare l'assorbimento, l'omeostasi e il trasporto del colesterolo a livello intestinale, processi vitali per la comprensione del metabolismo lipidico e delle malattie associate.

Le cellule Caco-2 rimangono una pietra miliare nella ricerca sul carcinoma del colon e nella tossicologia, non solo per la loro importanza negli studi sull'uomo, ma anche per il loro ruolo nel fornire informazioni dettagliate sulla via biliare, sul metabolismo degli xenobiotici all'interno del colon, sul cancro e sulla ricerca tossicologica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia