Caco-2-celler

Caco-2-celler fungerar som en avancerad in vitro-modell för den mänskliga tarmbarriären, främst på grund av att de differentieras till ett cellmonolager som är mycket likt enterocyterna i tunntarmen. Vid odling av Caco2-cellinjen på filterinsatser för vävnadsodling med polykarbonatfilter genomgår Caco-2-cellerna en spontan differentiering. Differentieringen av Caco2-celler resulterar i uttryck av specialiserade celltyper, kompletta med mikrovilli, enzymer och transportörer, vilket motsvarar de komplexa egenskaper och mekanismer som finns i en in vivo-situation.

När det gäller modeller för studier av tarmabsorption är Caco-2-celler, som härrör från en human kolorektal adenocarcinom-patient, viktiga eftersom de har förmågan att utveckla höga TEER-värden, vilket tyder på intakta tight junctions och epitelbarriärfunktion. Dessa egenskaper är avgörande för analyser som kolesterol efflux assay och undersökningar av cellulär transport, inklusive förflyttning av lipidnanopartiklar och detektering av proteininteraktioner.

Caco-2-celler är centrala för studier av tarmabsorption, eftersom de ger en tillförlitlig in vitro-liknande bild av tarmepitelet. Dessa celler, som efterliknar tarmens enterocyter, underlättar analyser av oral läkemedelsabsorption genom att simulera tarmbarriären. Forskare använder Caco-2-celler för att förutsäga hur substanser passerar tarmslemhinnan, vilket är avgörande för den farmakokinetiska profileringen av orala läkemedel. Dessutom är de ett viktigt verktyg för att undersöka upptag, homeostas och transport av kolesterol i tarmen, vilket är viktiga processer för att förstå lipidmetabolismen och därmed förknippade sjukdomar.

Caco-2-celler är fortfarande en hörnsten i forskningen om tjocktarmscancer och toxikologi, inte bara för sin relevans för gastrointestinala studier på människa utan också för sin roll när det gäller att ge detaljerade insikter i gallvägarna, metabolismen av xenobiotika i tjocktarmen, cancer och toxikologi.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring